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Biotin WGA，Biotin Wheat Germ Agglutinin的存儲方法
閱讀：49 發布時間：2025-9-24化學性質：
WGA（小麥胚芽凝集素）：WGA是一種二聚體蛋白，分子量約36 kDa，由兩條相同的多肽鏈（各含171個氨基酸）組成，無糖基化修飾。在酸性環境（pH <4）中可解離為單體，中性條件下維持二聚體結構。
生物素（Biotin）：通過化學鍵連接到WGA上，標記后仍保留WGA的糖結合活性。生物素數量經過優化，以確保染色效果。
WGA特異性識別N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）及其二聚體（殼二糖）、三聚體，也能結合含有唾液酸殘基的糖蛋白。
結合靶點廣泛存在于細胞膜糖蛋白、細菌肽聚糖、幾丁質、糖脂等結構中。
基本參數：
中文名：生物素化的小麥胚芽凝集素
英文名：Biotin WGA，Biotin Wheat Germ Agglutinin
規格標準：1mg、5mg、10mg
試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司
功能機制：
生物素-鏈霉親和素系統：生物素標記使WGA能與鏈霉親和素（或親和素）高親和力結合，實現信號放大與靶向檢測。
細胞作用：通過與細胞表面糖結構結合，可誘導細胞凋亡、自噬（如抗癌作用），或介導內吞作用。
相關應用：
細胞/組織染色（熒光標記）：
預處理：細胞/組織用緩沖液清洗2次，避免含糖蛋白的血清（減少非特異結合）。組織切片需封閉非特異性位點（如用BSA）。
孵育：加入稀釋的Biotin-WGA工作液，室溫或37°C孵育15-30分鐘（避光）。
清洗：用緩沖液洗滌3次（每次2分鐘），去除未結合WGA。
檢測：熒光顯微鏡觀察（激發/發射波長參考染料特性，如FITC濾光片用于AF488標記）。
糖蛋白沉淀（Pull-down）：
樣本處理：裂解細胞/組織，提取500 μg總蛋白于非變性緩沖液。
孵育：加入生物素化WGA（終濃度按需），4°C振蕩過夜。
捕獲：用鏈霉親和素磁珠結合WGA-糖蛋白復合物，清洗后分析。
ELISA/免疫檢測中的輔助應用：
作為二抗系統組分：
步驟：樣本→一抗→Biotin-WGA→酶標鏈霉親和素→底物顯色。
典型濃度：按1:100稀釋生物素化抗體（如99 μL緩沖液+1 μL母液）。
包裝：
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