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5-FAM,Single Isomer是一種綠色熒光標(biāo)記試劑
閱讀：45 發(fā)布時(shí)間：2025-10-27| 提 供 商 | 陜西新研博美生物科技有限公司 | 資料大小 | 109.1KB |
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化學(xué)性質(zhì)：
5-FAM（5-CarboxyFluorescein）是一種常用的熒光染料，其單異構(gòu)體形式（Single Isomer）確保了熒光信號(hào)的一致性和可預(yù)測(cè)性。5-FAM, Single Isomer (5-CarboxyFluorescein-Aminohexyl Amidite) 是一種用于寡核苷酸合成的亞磷酰胺試劑，通過(guò)氨基己基連接到亞磷酰胺骨架上，使其能夠方便地引入到寡核苷酸序列中。
基本參數(shù)：
中文名：5-FAM 亞磷酰胺單異構(gòu)體
英文名：5-FAM,Single Isomer (5-CarboxyFluorescein-Aminohexyl Amidite)
分子式：C46H58N3O10P
分子量：843.94
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg、5mg、10mg
試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司
合成方法：
5-FAM, Single Isomer (5-CarboxyFluorescein-Aminohexyl Amidite) 可以通過(guò)以下步驟合成：
溶解：將 5-FAM, Single Isomer 溶解在無(wú)水、無(wú)醇的二氯甲烷或乙腈中，濃度為 100 μmol/mL。
偶聯(lián)：在寡核苷酸合成過(guò)程中，將 5-FAM, Single Isomer 引入到特定位置。建議偶聯(lián)時(shí)間為 15 分鐘。使用快速脫保護(hù)的亞磷酰胺，如 ETT（LK3140/2/5）作為活化劑。
切割與脫保護(hù)：在 2-甲氧基乙胺/甲醇（1:3）溶液中，60°C 下反應(yīng) 3 小時(shí)或 25°C 下反應(yīng) 6 小時(shí)。過(guò)濾樣品并蒸發(fā)上清液，將標(biāo)記的寡核苷酸溶解在水中。避免使用強(qiáng)堿，如濃氨水，因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)致熒光團(tuán)降解。
相關(guān)應(yīng)用：
5-FAM 是一種常用的熒光標(biāo)記試劑，廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域：
實(shí)時(shí)定量 PCR（qPCR）：作為熒光探針的一部分，用于檢測(cè)目標(biāo)基因的表達(dá)水平。
熒光原位雜交（FISH）：標(biāo)記探針，用于檢測(cè)特定基因或染色體的定位。
基因測(cè)序：標(biāo)記引物或探針，用于熒光檢測(cè)。
分子信標(biāo)：作為熒光團(tuán)，用于設(shè)計(jì)分子信標(biāo)探針，檢測(cè)特定核酸序列的存在。
熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：作為供體或受體熒光團(tuán)，用于研究分子間的相互作用。
結(jié)構(gòu)式：
相關(guān)試劑產(chǎn)品：
5'-Dabcyl CE-Phosphoramidite
5'-TAMRA C12 Amidite (5-Isomer)
BHQ-0 DMT Amidite
CAL Fluor Gold 540 Amidite
4-Thio-dT CE-Phosphoramidite
Dabcyl-dT CE-Phosphoramidite
5'-TAMRA C12 Amidite (5-Isomer)
5'-Amino C12 Modifier (MMT-12-Aminododecyl Amidite)
Propyne dC (DBF) Amidite
5-Ethynyl-Uridine CE-Phosphoramidite
Cholesterol-tetraethylene glycol CE-phosphoramidite
Amino Modifier TEG mdC Amidite (5'-DMT-mdC(TEG-Amino-TFA))
BHQ-1 dT Linker Amidite
TAMRA Amidite (N-TAMRA-Piperidinyl), 5,6-Carboxy
dK CE-Phosphoramidite
BHQ-2 dT Linker Amidite
CAL Fluor Orange 560 C6 dT Amidite
CAL Fluor Orange 560 Amidite
5'-Fmoc-Amino C6 Modifier (Fmoc-6-Aminohexyl Amidite)
Quasar 705 C6 T Amidite
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