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5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer)是一種用于核酸合成的亞磷酰胺試劑
閱讀:44 發布時間:2025-10-29熒光特性:
吸收和發射波長:5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer) 的吸收波長為555 nm,發射波長為576 nm。
化學性質:
5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer) 是一種用于核酸合成的亞磷酰胺試劑,主要用于在寡核苷酸的5'末端摻入TAMRA(羅丹明)熒光染料,并帶有C12間隔區。
基本參數:
中文名:5'-TAMRA-C12 亞磷酰胺(5-異構體)
英文名:5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer),5-[N-1-dodecyl-12-O-(2-cyanoethyldiisopropylphosphoramidite)]-Tamra Carboxamide
分子量:814.19
Ex(nm):555
Em(nm):576
規格標準:1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
制備方法:
1. 5-TAMRA的合成
步驟1:在圓底燒瓶中,將4-(4-(dimethylamino)-2-hydroxybenzoyl)isophthalic acid(1.94 g,5.9 mmol,1.0 eq)和3-dimethylaminophenol(1.05 g,7.7 mmol,1.3 eq)溶解在DMF(20 mL)中。
步驟2:加入三甲基硅基聚磷酸溶液(6 mL)并回流3小時。
步驟3:在真空下除去溶劑,將殘渣溶解在5% NaOH(20 mL)中,室溫攪拌過夜。
步驟4:用水(75 mL)稀釋混合物,用濃HCl(5 mL)沉淀產物。
步驟5:過濾固體,用冷水(50 mL)洗滌,并在60°C下干燥過夜,得到紫色固體5-TAMRA,產率為39.5%(1.0 g)。
步驟6:產物直接用于下一步,未進行進一步純化。通過ESI-MS和1H NMR對產物進行了表征,ESI-MS顯示m/z為431.0,與理論值431.2相符;1H NMR譜圖顯示了產物的特征峰。
2. 5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer)的合成
步驟1:以5-TAMRA為起始原料,通過化學反應引入C12間隔臂。具體方法是將5-TAMRA與C12間隔臂的前體化合物進行偶聯反應,形成中間體。
步驟2:對中間體進行保護基團的修飾,通常使用DMT(4,4'-二甲氧基三苯甲基)保護基團來保護5-TAMRA的羧基,防止其在后續反應中發生不必要的反應。
步驟3:將保護后的中間體與2-氰乙基二異丙基氯化磷酰胺(N,N-diisopropyl-2-cyanoethylphosphoramidite)進行磷酰胺化反應,生成5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer)。
步驟4:通過純化步驟,如柱色譜法,去除未反應的原料和副產物,得到高純度的5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer)。
相關應用:
5’TAMRA C12 Amidite (5-Isomer) 是一種用于在寡核苷酸的5'端添加TAMRA(羅丹明)熒光染料的亞磷酰胺試劑。它帶有C12間隔區,可以有效減少熒光標記對核酸功能的干擾。這種標記方式廣泛應用于以下領域:
熒光探針合成:用于合成熒光探針,這些探針可用于檢測特定的核酸序列。
實時PCR:在實時PCR中,TAMRA標記的探針可以用于定量分析目標基因的表達水平。
熒光原位雜交(FISH):標記后的寡核苷酸可用于FISH實驗,用于細胞或組織中的核酸定位。
結構式:

相關試劑產品:
5'-TAMRA Amidite (N-TAMRA-Piperidinyl), 6-Carboxy Single Isomer
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5-TAMRA-PEG4-Methyltetrazine
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TAMRA-Phos-CPG, 6-Carboxy Single Isomer (5'-DMT-mdC(TEG-TAMRA)-Phos-CPG)
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