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2129651-80-3,6-TET,SE是一種氨基反應性熒光標記試劑
閱讀:59 發布時間:2025-11-20熒光特性:
激發波長:約521nm
發射波長:約542nm
熒光范圍:綠色-橙色
熒光量子產率:高,發光效率高,信號明亮
光穩定性:較好,適合在生化反應體系中使用
儀器匹配性:其激發和發射光譜與測序儀的激光器和光學濾光片系統精準匹配
結構特點:
6-TET-NHS以四氯熒光素為熒光發色團,通過琥珀酰亞胺酯(NHS ester)實現與氨基的高效偶聯。
NHS酯在pH 7-9的水性或緩沖溶液中與伯氨基反應,形成穩定的酰胺鍵,同時釋放N-羥基琥珀酰亞胺。
基本參數:
CAS:2129651-80-3
中文名:四氯熒光素-琥珀酰亞胺酯
英文名:6-TET,SE,6-TET-NHS
分子式:C25H11Cl4NO9
分子量:611.17
規格標準:1mg、5mg、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
標記流程:
溶解染料:將6-TET-NHS溶于無水DMSO或DMF,配制成1-10mM儲備液。
準備生物分子溶液:蛋白質/多肽溶解于不含伯氨基的緩沖液,避免使用Tris、甘氨酸等含氨基的緩沖鹽。
混合反應:按摩爾比將染料儲備液加入蛋白溶液中,輕輕渦旋混勻。在室溫(約25℃)或4℃避光孵育30min-2h。
淬滅未反應的NHS酯:加入過量伯氨基試劑至終濃度10-50mM,孵育10min。
純化標記產物:使用脫鹽柱、透析或超濾離心去除游離染料,獲得純化的標記蛋白。
計算標記率:通過測量280nm(蛋白)與6-TET吸收波長(約555nm)的吸光度,計算標記率。
相關應用:
核酸測序:尤其是毛細管電泳檢測,6-TET-NHS被指定用來標記“A"堿基(即ddATP),在桑格測序法中發揮重要作用。
熒光原位雜交(FISH):用于標記寡核苷酸探針,實現細胞內特定DNA序列的定位和可視化。
免疫熒光標記:與抗體等蛋白質分子偶聯,用于細胞或組織樣本中目標抗原的檢測和定位。
適配體與多肽標記:為適配體或多肽分子引入熒光信號,便于后續的分離、純化和檢測。
結構式:

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