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ATTO 425 Biotin是一種將熒光染料ATTO425與生物素共價偶聯(lián)的熒光探針
閱讀：54 發(fā)布時間：2025-11-24ATTO 425 Biotin 是一種將熒光染料ATTO425與生物素共價偶聯(lián)的熒光探針，主要用于生物素-親和素/鏈霉親和素系統(tǒng)的高靈敏度檢測與成像。以下是其詳細介紹：
化學(xué)性質(zhì)：
結(jié)構(gòu)：由ATTO425染料、間隔臂（Spacer）和生物素三部分構(gòu)成。ATTO 425，具有強共軛體系，生物素通過間隔臂與染料連接，確保熒光信號與高親和素結(jié)合能力并存。
光譜參數(shù)：
激發(fā)波長：約 436 nm（激發(fā)峰 439 nm）
發(fā)射波長：約 484 nm（發(fā)射峰 489 nm）
斯托克斯位移：較大（約 48 nm），適合藍色激光（如 442 nm 或 445 nm）激發(fā)，減少背景干擾。
熒光量子產(chǎn)率：高，提供強熒光信號。
光穩(wěn)定性：優(yōu)異，適合長時間成像及單分子檢測。
基本參數(shù)：
中文名：ATTO 425 生物素
英文名：ATTO 425 Biotin，AT 425 Biotin
規(guī)格標準：1mg、5mg、10mg
試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司
應(yīng)用技術(shù)：
免疫檢測：ELISA、Western Blot、免疫組織化學(xué)（IHC）等，通過生物素-親和素系統(tǒng)放大信號。
流式細胞術(shù)：作為熒光探針檢測細胞表面抗原并分選細胞。
蛋白質(zhì)/核酸研究：標記蛋白質(zhì)或寡核苷酸，用于相互作用研究、純化與檢測。
單分子檢測：高亮度、低背景和優(yōu)異光穩(wěn)定性使其成為單分子熒光實驗的理想工具。
高分辨率細胞成像
熒光原位雜交（FISH）：標記核酸探針，實現(xiàn)基因定位與表達分析。
細胞標記：結(jié)合高分辨率顯微鏡技術(shù)，觀察細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)動態(tài)。
活細胞成像：金屬無毒特性（如 ATTO 425 DBCO 綴合物）適合活細胞標記及體內(nèi)成像。
實驗優(yōu)化與注意事項：
熒光信號弱或無信號
原因：染料光降解、儲存溫度不當(dāng)、激發(fā)/發(fā)射波長不匹配。
解決：全程避光操作，長期保存于 -20°C 以下，確認激發(fā)光源（405-455 nm）與檢測通道（覆蓋 484 nm 發(fā)射峰）。
標記效率低
原因：蛋白濃度過低（< 2 mg/ml）、pH 不在最佳范圍（7.0-7.5）、二硫鍵未充分還原。
解決：濃縮蛋白至 ≥ 2 mg/ml（推薦 10 mg/ml），調(diào)節(jié)緩沖液 pH 至 7.0-7.5，使用 10 倍摩爾過量 TCEP 還原并去除還原劑。
過度標記
原因：蛋白表面可及半胱氨酸過多、染料用量過大或反應(yīng)時間過長。
解決：降低染料投料量或提高蛋白濃度，縮短反應(yīng)時間（< 2 h），加入少量 GSH 中止反應(yīng)。
包裝：
相關(guān)試劑產(chǎn)品：
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Biotin-C5-Amine
Biotin-diSulfo-Cy3 Tyramide
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Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin
ATTO 488-dextran
Biotin-PEG8-NHS ester
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BB1-CONH-PEG3-Biotin
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