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LumiTrackerMito Orange CM-H2TMRos是一種多功能線粒體探針
閱讀:36 發布時間:2026-6-18【Part 1:基礎知識】
英文名:LumiTrackerMito Orange CM-H2TMRos
分子式:C24H25ClN2O
分子量:392.93
供應商:陜西新研博美生物科技有限公司
【Part 2:理化性質】
外觀:紫色至粉色固體粉末。純度規格:經1H NMR和HPLC-MS檢測,純度≥95%。
溶解性:該探針為親脂性陽離子染料,可溶于DMSO、DMF等有機溶劑。
光譜數據:
激發波長(Ex) :551–555 nm
發射波長(Em) :576–578 nm
消光系數(M?1cm?1) :該探針為CMTMRos染料的還原型非熒光版本,需在線粒體膜上氧化后才會發出熒光,其熒光強度與線粒體的氧化狀態及膜電位直接相關,而非簡單的濃度-吸光度線性關系,因此常規消光系數不適用。
pH敏感性:
CM-H2TMRos的熒光發射依賴于線粒體膜電位(ΔΨm)而非溶液pH值。該探針為帶弱陽離子的親脂性染料,其在線粒體中的積累由膜電位驅動——膜電位越高,探針積累越多,熒光強度越強;當線粒體去極化時,熒光強度減弱甚至消失。作為還原型非熒光前體,CM-H2TMRos本身不發光,進入活性線粒體后在線粒體膜上被氧化為熒光型的CMTMRos。在常規細胞實驗的pH范圍(pH 7.0–8.0)內,該探針的染色性能穩定,推薦使用pH 7.4的PBS或細胞培養基進行孵育。需要特別注意的是,該探針對氧化敏感,操作過程中應避免與強氧化劑或還原劑長時間接觸。

【Part 3:相關應用】
應用1:活細胞線粒體形態、分布與網絡結構觀察
LumiTracker Mito Orange CM-H2TMRos可于活細胞線粒體形態、分布和網絡結構觀察的熒光探針。
應用2:線粒體膜電位(ΔΨm)的檢測與細胞健康狀態評估
CM-H2TMRos可對線粒體膜電位進行檢測,以熒光強度反映膜電位高低。該探針的積累具有嚴格的膜電位依賴性——在具有正常膜電位的活性線粒體中,探針大量積累并發出明亮的橙色熒光;當線粒體膜電位降低(如在凋亡早期細胞中發生線粒體去極化)時,探針的積累減少,熒光強度減弱甚至消失。
應用3:固定后免疫細胞化學與原位雜交的兼容性染色
與傳統的線粒體熒光探針(如TMR和羅丹明123)不同——后者在膜電位喪失后易從線粒體中被洗掉,限制了其在固定實驗中的應用——CM-H2TMRos含有弱巰基反應性的氯甲基官能團,可與線粒體蛋白的巰基(-SH)共價結合。
應用4:流式細胞術中的線粒體功能分析與多參數檢測
CM-H2TMRos適用于流式細胞儀平臺,可實現高通量的線粒體功能分析。在流式細胞術中,該探針的橙色熒光信號可用于區分具有不同線粒體膜電位的細胞亞群——正常細胞的熒光強度高,而膜電位受損細胞(如凋亡細胞、代謝異常細胞)的熒光強度低。該探針常與LysoTracker(溶酶體探針)、MitoROS(線粒體活性氧探針)等進行共染,實現多細胞器同步分析。
【Part 4:同系列試劑(≥20個)】
MitoTracker Green FM(線粒體綠色熒光探針),CAS: 201860-17-5
MitoTracker Orange CMTMRos(線粒體橙色熒光探針,氧化型),CAS: 199116-50-2
MitoTracker Red CMXRos(線粒體紅色熒光探針),CAS: 167095-09-2
MitoTracker Red CM-H2XRos(線粒體紅色熒光探針,還原型),CAS: 167095-08-1
MitoTracker Red FM(線粒體紅色熒光探針)
MitoTracker Deep Red FM(線粒體深紅色熒光探針)
LumiTracker Mito Red CMXRos(線粒體紅色熒光探針),CAS: 167095-09-2
LumiTracker Mito Red FM(線粒體紅色熒光探針)
LumiTracker Mito Green FM(線粒體綠色熒光探針),CAS: 201860-17-5
LysoTracker Green DND-26(溶酶體綠色熒光探針),CAS: 201860-17-5
LysoTracker Red DND-99(溶酶體紅色熒光探針)
JC-1(線粒體膜電位檢測探針),CAS: 3520-43-2
JC-10(線粒體膜電位檢測探針),CAS: 150325-47-4
Rhodamine 123(羅丹明123,線粒體熒光探針),CAS: 62669-70-9
Tetramethylrhodamine methyl ester(TMRM,四甲基羅丹明甲酯),CAS: 115532-52-0
Tetramethylrhodamine ethyl ester(TMRE,四甲基羅丹明乙酯),CAS: 115532-51-9
MitoSOX Red(線粒體超氧化物指示劑)
MitoPY1(線粒體鋅離子熒光探針)
MitoCLox(線粒體脂質過氧化熒光探針)
MitoTracker Red CMXRos(線粒體紅色熒光探針,特殊包裝),CAS: 167095-09-2
MitoTracker Deep Red FM(線粒體深紅色熒光探針,特殊包裝)
10-Nonyl acridine orange(NAO,線粒體心磷脂探針),CAS: 75168-11-5
Dihydrorhodamine 123(DHR 123,活性氧檢測探針),CAS: 109244-58-8
【Part 5:注意事項】
反應條件建議(pH、溫度、時間):
染色液配制:將50 μg探針溶于150 μL高質量無水DMSO中,配制成1 mM儲備液。儲備液應分裝保存,避免反復凍融。
工作濃度:用無血清細胞培養基或含血清培養基將儲備液稀釋至25–500 nM的工作濃度。對于固定后染色的實驗,建議使用100–1000 nM的工作濃度。不同細胞類型的最佳染色濃度可能存在差異,建議在初次實驗時進行濃度梯度優化。
孵育條件:將染色液預熱至細胞培養溫度(37°C),然后將細胞浸入染色液中,于37°C孵育15–45分鐘。若熒光染色強度不足,可選擇以下優化方案:①在正常培養基中繼續孵育30分鐘,使巰基共軛反應充分進行;②適當提高染色液的初始濃度。
固定處理:若需要進行固定,染色后用3.7%甲醛(溶于PBS,pH 7.4)固定細胞10分鐘,然后用PBS清洗三次,每次5分鐘。
pH條件:染色和固定過程中建議使用pH 7.4的PBS或細胞培養基。
避光儲存要求:
該探針對光和濕度敏感。應在-20°C避光、干燥條件下密封保存。運輸可在室溫條件下進行(不超過三周)。取用時應避免長時間暴露于環境光線和空氣中,建議在暗處或低光照條件下操作。未使用完畢的儲備液應立即密封并返回-20°C保存。產品在正確儲存條件下有效期至少為6個月,部分供應商標注為24個月(自交付之日起)。使用時應注意避免頻繁解凍和反復凍融,建議現配現用。
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