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AF405-Protein A通過AF405的藍色熒光信號完成細胞內靶標蛋白的定位標記
閱讀:22 發布時間:2026-7-17一、技術參數
中文名:AF405標記的重組蛋白A,重組蛋白A, AF405偶聯物
英文名:AF405-Protein A,AF405-Recombinant Protein A,Recombinant Protein A, AF405 conjugate
保存條件:-20℃避光密封保存
溶解性:溶于1× PBS等生理緩沖液
外觀性狀:液體(0.2 mg/mL溶液)
產品純度:≥95%(Protein A或G親和純化)
熒光特性:Ex/Em = 405 nm / 421 nm
激光激發:405 nm紫光激光
偶聯方式:AF405 NHS酯與重組蛋白A表面伯氨基共價偶聯
實驗室:陜西新研博美生物科技有限公司
規格:10mg,25mg,50mg
包裝:

二、試劑定義與結構組成
AF405-Recombinant Protein A(AF405標記重組蛋白A)是將高亮度藍色熒光染料Alexa Fluor 405與重組蛋白A通過共價偶聯形成的熒光探針,廣泛應用于抗體檢測、免疫分析、流式細胞術及蛋白質相互作用研究等科研領域。
從化學結構與組成層面來看,AF405-Recombinant Protein A的核心骨架由重組蛋白A與Alexa Fluor 405熒光團兩部分構成:
重組蛋白A部分:重組蛋白A是一種蛋白,包含蛋白A的5個IgG結合結構域。天然蛋白A是細胞壁表面蛋白,發現于金黃色葡萄球菌的細胞壁中。重組蛋白A在天然蛋白A的基礎上去除了細胞壁結合區、細胞膜結合區和白蛋白結合區,以確保特異性IgG結合。
Alexa Fluor 405熒光團部分:AF405是一種明亮的藍色熒光染料,激發峰約401–405 nm,發射峰約421 nm。AF405是水溶性染料,在pH 4至pH 10范圍內熒光穩定。AF405通過NHS酯(琥珀酰亞胺酯)活化形式與重組蛋白A表面的伯氨基(主要為賴氨酸殘基的ε-氨基)發生反應,形成穩定的酰胺共價鍵。NHS酯是蛋白質和抗體標記中的胺反應性基團。
三、產品特性
1. 藍色熒光性能優異、背景低:AF405激發峰約401–405 nm,發射峰約421 nm,適配配備405 nm紫光激光的流式細胞儀和共聚焦顯微鏡。具有高光穩定性和低背景特性,在成像和流式細胞術中可穩定產生信號。
2. 基因工程改造優勢:重組蛋白A經基因工程改造,去除了細胞壁結合區、細胞膜結合區和白蛋白結合區,確保特異性IgG結合。
3. pH穩定性優異:AF405在pH 4至pH 10范圍內熒光穩定,適用于多種生理及非生理緩沖液體系。
4. 多色兼容性優異:AF405的藍色發射光譜(~421 nm)與綠色(如AF488、FITC,~520 nm)、橙紅色(如PE、Cy3,~570 nm)及遠紅光(如APC、Cy5,~670 nm)等熒光染料光譜重疊極小,適合構建多通道流式細胞術和成像實驗體系。
5. 應用范圍廣泛:AF405標記的重組蛋白A已驗證可用于流式細胞術、免疫熒光(IF/ICC)、免疫組織化學(IHC)、ELISA和Western Blot等多種實驗平臺。
四、相關應用
流式細胞術(Flow Cytometry)免疫檢測
核心原理:AF405的熒光信號可被流式細胞儀的405 nm紫光激光激發。AF405-Recombinant Protein A通過其Fc結合域特異性識別并結合細胞表面或胞內的IgG抗體。
免疫熒光(IF/ICC)與免疫組織化學(IHC)
核心原理:AF405-Recombinant Protein A通過其Fc結合域特異性識別并結合一抗的Fc區,替代傳統的熒光標記二抗,實現目標抗原的間接熒光檢測。AF405的藍色熒光信號在熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下清晰顯示目標蛋白在細胞或組織中的空間分布。
ELISA與免疫檢測
核心原理:AF405-Recombinant Protein A可作為檢測抗體用于ELISA平臺。重組蛋白A單克隆抗體已驗證可用于直接ELISA檢測。在夾心ELISA或直接ELISA中,AF405-蛋白A與固相上捕獲的抗體Fc區結合,通過AF405的藍色熒光信號實現目標分析物的高靈敏度定量檢測。
Western Blot
核心原理:AF405-Recombinant Protein A通過其Fc結合域特異性識別并結合膜上轉移的抗體Fc區。AF405的藍色熒光信號在熒光成像系統中清晰顯示目標蛋白條帶。
免疫沉淀(Immunoprecipitation)
核心原理:AF405-Recombinant Protein A可通過其Fc結合域與目標抗體的Fc區結合,形成抗體-抗原-熒光蛋白A復合物。在免疫沉淀實驗中,熒光標記的蛋白A可用于監測免疫沉淀的效率與特異性。
四、相關試劑
AF405標記重組蛋白A系列
AF405-重組蛋白A(rProtein A) (AF405標記重組蛋白A)
AF405-重組蛋白A/G(rProtein A/G) (AF405標記重組蛋白A/G)
AF405-重組耐堿蛋白A(AF405標記重組耐堿蛋白A)
AF405標記重組蛋白G系列
AF405-重組蛋白G(rProtein G) (AF405標記重組蛋白G)
AF405-重組蛋白A/G(rProtein A/G) (AF405標記重組蛋白A/G)
其他熒光染料標記重組蛋白A系列
AF350-重組蛋白A(Alexa Fluor 350標記重組蛋白A)
AF488-重組蛋白A(Alexa Fluor 488標記重組蛋白A)
AF532-重組蛋白A(Alexa Fluor 532標記重組蛋白A)
AF594-重組蛋白A(Alexa Fluor 594標記重組蛋白A)
AF647-重組蛋白A(Alexa Fluor 647標記重組蛋白A)
FITC-重組蛋白A(FITC標記重組蛋白A)
TRITC-重組蛋白A(TRITC標記重組蛋白A)
Cy3-重組蛋白A(Cyanine 3標記重組蛋白A)
Cy5-重組蛋白A(Cyanine 5標記重組蛋白A)
Cy7-重組蛋白A(Cyanine 7標記重組蛋白A)
HRP-重組蛋白A(辣根過氧化物酶標記重組蛋白A)
生物素-重組蛋白A(Biotin標記重組蛋白A)
光譜類似染料標記重組蛋白A系列(~405 nm激發/421 nm發射)
Pacific Blue-重組蛋白A(Pacific Blue標記重組蛋白A)
Cascade Blue-重組蛋白A(Cascade Blue標記重組蛋白A)
AbBy Fluor-405-重組蛋白A(AbBy Fluor-405標記重組蛋白A)
iFluor 405-重組蛋白A(iFluor 405標記重組蛋白A)
DyLight 405-重組蛋白A(DyLight 405標記重組蛋白A)
AF405標記其他功能性蛋白系列
AF405-鏈霉親和素(Streptavidin) (AF405標記鏈霉親和素)
AF405-牛血清白蛋白(BSA) (AF405標記BSA)
AF405-轉鐵蛋白(Transferrin) (AF405標記轉鐵蛋白)
AF405-刀豆蛋白A(Con A) (AF405標記刀豆蛋白A)
AF405-小麥胚芽凝集素(WGA) (AF405標記小麥胚芽凝集素)
AF405活性染料系列(用于自行標記)
AF405-NHS酯(AF405琥珀酰亞胺酯,標記伯氨基)
AF405-馬來酰亞胺(Maleimide) (AF405馬來酰亞胺,標記巰基)
AF405-疊氮化物(Azide) (AF405疊氮化物,點擊化學)
AF405-炔烴(Alkyne) (AF405炔烴,點擊化學)
AF405-四嗪(Tetrazine) (AF405四嗪,點擊化學)
溫馨提示:上述信息均由陜西新研博美生物科技有限公司的小編 XYBMWD所整理。
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