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FITC-Protein A追蹤細胞表面IgG的表達水平及動態(tài)變化,用于研究免疫應答
閱讀:14 發(fā)布時間:2026-7-20一、技術參數(shù)
中文名:FITC標記的重組蛋白A
英文名:Fluorescein Recombinant Protein A,F(xiàn)ITC-Protein A,F(xiàn)luorescein-Recombinant Protein A
保存條件:-20℃避光、干燥密封保存
溶解性:可溶于PBS等生理緩沖液及部分有機溶劑
外觀性狀:固體/粉末或溶液
產(chǎn)品純度:≥95%
激發(fā)/發(fā)射峰:約492–495 nm / 515–528 nm
熒光顏色:綠色
供應商:陜西新研博美生物科技有限公司
規(guī)格:10mg,25mg,50mg
包裝:

二、試劑定義與結構組成
FITC-Recombinant Protein A(FITC標記重組蛋白A)是將異硫氰酸熒光素(FITC)通過穩(wěn)定的共價偶聯(lián)方式標記到重組蛋白A分子上的一種熒光標記蛋白試劑。該試劑在保留蛋白A原有IgG結合特性的基礎上,引入了穩(wěn)定而清晰的綠色熒光信號功能,廣泛應用于抗體檢測、免疫分析、流式細胞術及免疫熒光等科研領域。
從化學結構與組成層面來看,F(xiàn)ITC-Recombinant Protein A的核心骨架由重組蛋白A與FITC熒光團兩部分構成:
重組蛋白A部分:蛋白A是一種來源于金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) 的細胞壁蛋白質。重組蛋白A是在天然蛋白A的基礎上進行基因工程改造的產(chǎn)物,由四個Fc結合結構域片段串聯(lián)連接而成。重組蛋白A在天然蛋白A的基礎上去除了細胞壁結合區(qū)、細胞膜結合區(qū)和白蛋白結合區(qū),以確保特異性IgG結合。蛋白A可特異性地與很多哺乳動物的IgG及少數(shù)IgM和IgA結合,主要是與免疫球蛋白重鏈的Fc區(qū)結合。一個蛋白A分子已被證明可同時結合至少2個IgG分子。
FITC熒光團部分:FITC是一種經(jīng)典的綠色熒光染料,分子量約390 Da。FITC激發(fā)峰約492–495 nm,發(fā)射峰約515–528 nm。FITC通過其異硫氰酸酯基團與重組蛋白A表面的伯氨基(主要為賴氨酸殘基的ε-氨基)發(fā)生反應,形成穩(wěn)定的硫脲共價鍵。
三、產(chǎn)品特性
1. 綠色熒光性能優(yōu)異、檢測靈敏:FITC激發(fā)峰約492–495 nm,發(fā)射峰約515–528 nm,呈明亮的綠色熒光。FITC屬于可見光波段的常用熒光染料,具有較高的檢測靈敏度和良好的光穩(wěn)定性。FITC的綠色熒光信號與多種光學檢測平臺兼容,適合熒光顯微鏡、流式細胞儀、熒光酶標儀等儀器檢測。
2. 與天然蛋白A相比,重組蛋白A去除了非特異性結合區(qū)域,增強了與IgG Fc區(qū)結合的專一性。
3. 基因工程改造優(yōu)勢:重組蛋白A經(jīng)基因工程改造,去除了細胞壁結合區(qū)、細胞膜結合區(qū)和白蛋白結合區(qū),確保特異性IgG結合。
4. 熒光標記不影響IgG結合活性:FITC與蛋白A的偶聯(lián)不影響蛋白A與抗體結合的活性。偶聯(lián)后的FITC-Protein A保留蛋白A的IgG結合能力,同時獲得熒光標記功能。
5. 多色兼容性優(yōu)異:FITC的綠色發(fā)射光譜(~515–528 nm)與紅色(如Cy3、PE)及遠紅光(如Cy5、APC)等熒光染料光譜重疊極小,適合構建多通道流式細胞術和成像實驗體系。
6. 應用范圍廣泛:FITC標記的重組蛋白A已驗證可用于免疫熒光顯微鏡(IF)、流式細胞術(FCM)、熒光ELISA(FLISA)、熒光Western Blot等多種實驗平臺。
7. 批次一致性與高純度:試劑經(jīng)免疫電泳檢測,與抗FITC和抗蛋白A抗體反應呈現(xiàn)單一沉淀弧。純度≥95%。
四、相關應用
流式細胞術(Flow Cytometry)免疫表型分析
核心原理:FITC-Recombinant Protein A通過其Fc結合域特異性識別并結合細胞表面或胞內(nèi)的IgG抗體。該應用廣泛用于B細胞和漿細胞免疫表型分析、抗體分泌細胞檢測及免疫細胞亞群功能研究。
熒光ELISA(FLISA)與免疫檢測
核心原理:FITC-Recombinant Protein A可作為檢測試劑用于ELISA平臺。在直接ELISA或夾心ELISA中,F(xiàn)ITC-蛋白A與固相上捕獲的抗體Fc區(qū)結合,通過FITC的綠色熒光信號實現(xiàn)目標分析物的高靈敏度定量檢測。FITC-重組蛋白A可通過熒光信號檢測抗體的存在和濃度,常用于ELISA和流式細胞術等實驗中。
蛋白質-蛋白質相互作用研究
核心原理:FITC-Recombinant Protein A可作為熒光探針,用于研究蛋白A與免疫球蛋白的結合動力學。通過熒光偏振(FP) 等技術,可實時監(jiān)測蛋白A與IgG的結合過程。FITC-重組蛋白A常被用作熒光標記物來追蹤和監(jiān)測Protein A在細胞內(nèi)的動態(tài)變化。
五、相關試劑
FITC標記重組蛋白A系列
FITC-重組蛋白A(rProtein A)
FITC-重組蛋白A(凍干粉)
FITC-重組蛋白A(溶液)
FITC-PEG-重組蛋白A(FITC-PEG-Protein A)
FITC-重組蛋白A/G(rProtein A/G)
FITC-重組耐堿蛋白A
Alexa Fluor系列標記重組蛋白A
AF350-重組蛋白A(AF350-Protein A) (藍色熒光)
AF405-重組蛋白A(AF405-Protein A) (藍色熒光)
AF488-重組蛋白A(AF488-Protein A) (綠色熒光)
AF532-重組蛋白A(AF532-Protein A) (黃綠色熒光)
AF594-重組蛋白A(AF594-Protein A) (紅色熒光)
AF647-重組蛋白A(AF647-Protein A) (遠紅光熒光)
Alexa Fluor 488-Protein A(P11047)
Alexa Fluor 546-Protein A(P11049)
Alexa Fluor 594-Protein A(P11051)
Alexa Fluor 647-Protein A(P21462)
其他熒光染料標記重組蛋白A系列
TRITC-重組蛋白A(TRITC-Protein A) (橙紅色熒光)
Cy3-重組蛋白A(Cy3-Protein A) (橙紅色熒光)
Cy5-重組蛋白A(Cy5-Protein A) (遠紅光熒光)
Cy7-重組蛋白A(Cy7-Protein A) (近紅外熒光)
Rhodamine-重組蛋白A(Rhodamine-Protein A) (紅色熒光)
功能化標記重組蛋白A系列
HRP-重組蛋白A(HRP-Protein A) (酶標記)
生物素-重組蛋白A(Biotin-Protein A) (生物素標記)
膠體金-重組蛋白A(Gold-Protein A) (金標)
FITC標記其他功能性蛋白系列
FITC-鏈霉親和素(Streptavidin)
FITC-刀豆蛋白A(Con A)
FITC-小麥胚芽凝集素(WGA)
FITC-牛血清白蛋白(BSA)
FITC-轉鐵蛋白(Transferrin)
FITC活性染料系列(用于自行標記)
FITC-NHS酯(FITC琥珀酰亞胺酯,標記伯氨基)
FITC-異硫氰酸酯(FITC) (直接標記試劑)
FITC-馬來酰亞胺(Maleimide) (標記巰基)
溫馨提示:上述信息均由陜西新研博美生物科技有限公司的小編 XYBMWD所整理。
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