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AF532-Protein A用于流式細(xì)胞術(shù)中，對(duì)結(jié)合在細(xì)胞表面的抗體進(jìn)行熒光標(biāo)記
閱讀：15 發(fā)布時(shí)間：2026-7-20| 提 供 商 | 陜西新研博美生物科技有限公司 | 資料大小 | 495.3KB |
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一、技術(shù)參數(shù)
中文名：AF532標(biāo)記的重組蛋白A，重組蛋白A, AF532偶聯(lián)物
英文名：AF532-Protein A，AF532-Recombinant Protein A，Recombinant Protein A, AF532 conjugate
保存條件：-20℃以下冰凍、干燥、避光密封保存
溶解性：溶于1× PBS等生理緩沖液；亮黃綠色透明溶液
外觀性狀：溶液或凍干粉
純度：≥95%（HPLC）
熒光特性：Ex/Em ≈ 531–534 nm / 553–554 nm
實(shí)驗(yàn)室：陜西新研博美生物科技有限公司
規(guī)格：10mg，25mg，50mg
包裝：
二、試劑定義與結(jié)構(gòu)組成
AF532-Recombinant Protein A（AF532標(biāo)記重組蛋白A）是將高亮度黃綠色熒光染料Alexa Fluor 532與基因工程改造的重組蛋白A通過(guò)共價(jià)偶聯(lián)形成的熒光探針，廣泛應(yīng)用于抗體檢測(cè)、免疫分析、流式細(xì)胞術(shù)及蛋白質(zhì)相互作用研究等科研領(lǐng)域。
從化學(xué)結(jié)構(gòu)與組成層面來(lái)看，AF532-Recombinant Protein A的核心骨架由重組蛋白A與Alexa Fluor 532熒光團(tuán)兩部分構(gòu)成：
重組蛋白A部分：重組蛋白A是一種基因工程改造的蛋白，包含5個(gè)IgG結(jié)合結(jié)構(gòu)域。重組蛋白A在天然蛋白A的基礎(chǔ)上去除了細(xì)胞壁結(jié)合區(qū)、細(xì)胞膜結(jié)合區(qū)和白蛋白結(jié)合區(qū)，以確保特異性IgG結(jié)合。重組蛋白A用于純化多克隆或單克隆IgG抗體。一個(gè)蛋白A分子能同時(shí)結(jié)合至少2個(gè)IgG分子。
Alexa Fluor 532熒光團(tuán)部分：AF532是一種明亮、光穩(wěn)定性?xún)?yōu)異、親水性的黃綠色熒光染料，激發(fā)峰約為531–534 nm，發(fā)射峰約為553–554 nm。AF532通過(guò)NHS酯（琥珀酰亞胺酯）活化形式與重組蛋白A表面的伯氨基（主要為賴(lài)氨酸殘基的ε-氨基）發(fā)生反應(yīng)，形成穩(wěn)定的酰胺共價(jià)鍵。NHS酯是將該染料與蛋白質(zhì)或抗體偶聯(lián)的最工具。
三、產(chǎn)品特性
1. 黃綠色熒光性能優(yōu)異：Alexa Fluor 532是一種明亮、光穩(wěn)定性?xún)?yōu)異的黃綠色熒光染料，激發(fā)峰約為531–534 nm，發(fā)射峰約為553–554 nm。具有高消光系數(shù)和高量子產(chǎn)率。在pH 4至pH 10范圍內(nèi)熒光穩(wěn)定。AF532偶聯(lián)物比其它光譜相似熒光基團(tuán)的偶聯(lián)物更亮、光穩(wěn)定性更好。
2. IgG結(jié)合特異性強(qiáng)：重組蛋白A可結(jié)合多種人、小鼠和大鼠IgG亞型——人IgG1、IgG2、IgG4；小鼠IgG2a、IgG2b、IgG3；大鼠IgG2c。也可結(jié)合兔、豚鼠、豬、狗和貓的總IgG。與天然蛋白A相比，重組蛋白A去除了非特異性結(jié)合區(qū)域，增強(qiáng)了與IgG Fc區(qū)結(jié)合的專(zhuān)一性。
3. 基因工程改造優(yōu)勢(shì)：重組蛋白A經(jīng)基因工程改造，去除了細(xì)胞壁結(jié)合區(qū)、細(xì)胞膜結(jié)合區(qū)和白蛋白結(jié)合區(qū)，確保特異性IgG結(jié)合。
4. 水溶性好、生物相容性高：AF532是親水性熒光染料。水溶性良好，在pH 4至pH 10范圍內(nèi)穩(wěn)定。標(biāo)記蛋白不會(huì)引起蛋白聚集，可直接在生理緩沖液中使用。
5. 多色兼容性?xún)?yōu)異：AF532的黃綠色發(fā)射光譜（~554 nm）與藍(lán)色（如DAPI、AF405）、紅色（如AF594、Cy3）及遠(yuǎn)紅光（如AF647、Cy5）等熒光染料光譜重疊極小，非常適合構(gòu)建多通道流式細(xì)胞術(shù)和成像實(shí)驗(yàn)體系。
6. 應(yīng)用范圍廣泛：AF532標(biāo)記的重組蛋白A已驗(yàn)證可用于ELISA和流式細(xì)胞術(shù)等多種實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。
四、相關(guān)應(yīng)用
應(yīng)用一：ELISA與免疫檢測(cè)
核心原理：AF532-Recombinant Protein A通過(guò)其Fc結(jié)合域特異性識(shí)別并結(jié)合抗體Fc區(qū)。在直接ELISA中，AF532-蛋白A與固相上捕獲的抗體Fc區(qū)結(jié)合，通過(guò)AF532的黃綠色熒光信號(hào)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)分析物的檢測(cè)。
應(yīng)用二：Western Blot
核心原理：AF532-Recombinant Protein A通過(guò)其Fc結(jié)合域特異性識(shí)別并結(jié)合膜上轉(zhuǎn)移的抗體Fc區(qū)。AF532的黃綠色熒光信號(hào)在熒光成像系統(tǒng)中清晰顯示目標(biāo)蛋白條帶。
應(yīng)用三：免疫熒光（IF/ICC）與免疫組織化學(xué)（IHC）
核心原理：AF532-Recombinant Protein A通過(guò)其Fc結(jié)合域特異性識(shí)別并結(jié)合一抗的Fc區(qū)，替代傳統(tǒng)的熒光標(biāo)記二抗，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)抗原的間接熒光檢測(cè)。AF532的黃綠色熒光信號(hào)在熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下清晰顯示目標(biāo)蛋白在細(xì)胞或組織中的空間分布。
應(yīng)用四：蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究
核心原理：AF532-Recombinant Protein A可作為熒光探針，用于研究蛋白A與免疫球蛋白的結(jié)合動(dòng)力學(xué)。通過(guò)熒光偏振（FP） 或表面等離子體共振（SPR） 等技術(shù)，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)蛋白A與IgG的結(jié)合過(guò)程，計(jì)算結(jié)合常數(shù)與解離速率。
五、相關(guān)試劑
AF532標(biāo)記重組蛋白A系列
AF532-重組蛋白A（rProtein A）
AF532-重組蛋白A/G（rProtein A/G）
AF532-重組耐堿蛋白A
Protein A Alexa Fluor 532-conjugated Antibody
AF532標(biāo)記重組蛋白G系列
AF532-重組蛋白G（rProtein G）
AF532-重組蛋白A/G（rProtein A/G）
其他Alexa Fluor系列標(biāo)記重組蛋白A
AF350-重組蛋白A（AF350-Protein A）
AF488-重組蛋白A（AF488-Protein A）
AF594-重組蛋白A（AF594-Protein A）
AF647-重組蛋白A（AF647-Protein A）
其他熒光染料標(biāo)記重組蛋白A系列
FITC-重組蛋白A（FITC-Protein A）
TRITC-重組蛋白A（TRITC-Protein A）
Cy3-重組蛋白A（Cy3-Protein A）
Rhodamine-重組蛋白A（Rhodamine-Protein A）
Biotin-重組蛋白A（Biotin-Protein A）
HRP-重組蛋白A（HRP-Protein A）
其他Alexa Fluor系列標(biāo)記重組蛋白A/G
AF488-重組蛋白A/G（AF488-Protein A/G）
AF594-重組蛋白A/G（AF594-Protein A/G）
AF647-重組蛋白A/G（AF647-Protein A/G）
AF532標(biāo)記其他功能性蛋白系列
AF532-鏈霉親和素（Streptavidin）
AF532-山羊抗小鼠IgG（Goat Anti-Mouse IgG）
AF532-山羊抗兔IgG（Goat Anti-Rabbit IgG）
AF532-牛血清白蛋白（BSA）
AF532-轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin）
其他Alexa Fluor系列蛋白A偶聯(lián)物
Alexa Fluor 488-Protein A
Alexa Fluor 546-Protein A
Alexa Fluor 568-Protein A
Alexa Fluor 594-Protein A
Alexa Fluor 647-Protein A
AF532活性染料系列（用于自行標(biāo)記）
AF532-NHS酯（Alexa Fluor 532 NHS Ester）
AF532-馬來(lái)酰亞胺（Maleimide）
AF532-疊氮化物（Azide） （點(diǎn)擊化學(xué)）
溫馨提示：上述信息均由陜西新研博美生物科技有限公司的小編 XYBMWD所整理。
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