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應用分享|GMP級別TryPLUS消化液助力病毒生產工藝開發!
基因治療,也稱為細胞和基因治療(CellandGeneTherapy),是一種利用基因治療載體將外源治療性基因轉導至細胞,再通過外源基因的轉錄和翻譯,改變細胞原有基因表達從而達到治療疾病的目的。目前,國內基于基因治療的生產工藝主要涉及兩個方向,第一類即基于溶瘤病毒進行相關藥物開發,第二類即基于質粒/病毒載體介導的基因療法。溶瘤病毒不僅可以發揮直接由病毒介導的腫瘤細胞殺傷功能,也能通過破壞腫瘤血管系統從而達到間接殺傷腫瘤的目的。對于基因治療中的腺病毒AAV載體,其能夠長期存在于未分裂、最終分化的細 -
Chaselection D-熒光素鉀鹽在體外生物發光、體內活體成像的檢測方法!
一、體外生物發光檢測1.將細胞鋪在24孔黑孔板上,鋪板密度為0.5-2.0×105個細胞/孔,37℃,培養過夜。2.用超純水配制15mg/mL的D-螢光素儲存液(100×)。注:D-螢光素溶液最好現用現配,也可分裝后-20℃避光凍存,有效期1個月。3.用預熱好的細胞培養基1:100稀釋儲存液,配制終濃度150μg/mL的D-螢光素工作液(1×)。4.去除培養細胞的培養基直至無殘留。5.向細胞內添加1×D-螢光素工作液后,立即進行圖像分析。二、小鼠活體成像檢測1.用無菌的DPBS(noMg2+、C -
隨著越來越多的生物制品進入治療領域,該類制品的質量控制也日趨嚴格,其中核酸殘留一項是各類質控標準的重中之重,因為DNA的穩定性,容易在生產過程中產生殘留,而這些生物制品應用到人類疾病治療時,會帶來不可控危險因素。終產品的宿主核酸殘留量必須遵循WHO、FDA和EMEA以及我國NMPA監管條例。尤其近年來包括進口產品在內的狂犬疫苗DNA殘留超標問題,引起了社會和業界的廣泛關注。生產生物制品的宿主細胞多是連續傳代細胞(continuouscelllines,CCLs),其調控生長的基因失靈,而擁有無限
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Revvity的明星產品LabChipGXIITouch毛細管電泳系統采用一個單吸管微流體芯片,可快速對96或384孔板中的蛋白質樣品進行指征分析。微流體芯片技術可全自動的完成蛋白質樣品的染色、脫色、電泳分離和分析。Labchip儀器的光學元件檢測到激光誘導的熒光信號后,易于操作的系統軟件自動分析數據,并通過Ladder和內標校正為用戶提供蛋白質相對濃度、分子大小和純度等。可立即生成虛擬膠圖、電泳峰圖或匯總表格式的電子數據結果以供用戶查閱或報告(如圖1)。圖1.LabChipGXIITouch軟
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賽橋Gentle Exp全封閉自動化細胞擴增系統,專為免疫細胞設計
產品概述GentleExp全封閉自動化細胞擴增系統旨在為細胞培養企業提供可靠、高效和方便的細胞培養解決方案,該系統采用了特殊設計的擺動平臺,通過控制搖擺速度、搖擺角度、氣體流量、pH、DO、溫度、二氧化碳濃度或氧氣濃度等參數,來提供良好的細胞培養環境。產品優勢快速更換支持快速更換10L、20L、50L不同規格的托盤,方便滿足不同規模的細胞培養需求,從小試研發到中試和生產的全部階段均可適用變頻調速支持自定義搖擺加速度,進一步降低剪切力,保護細胞的完整性和生物活性過程靈活實時監控溫度、pH/DO、氣 -
Lonza Cocoon和4D電轉聯用T細胞非病毒轉導擴增方案
自體T細胞免疫療法的研究和開發進展迅速,但關鍵瓶頸在于擴大制造規模以滿足商業需求。其中一個關鍵痛點是GMP病毒載體(慢病毒和γ-逆轉錄病毒)的安全性、漫長的生產周期和高額的費用。解決這個問題的一個辦法是利用非病毒轉染方法對細胞進行基因修飾。Lonza的4D-Nucleofector™LV單元采用電穿孔技術,可實現自動化、可擴展多種細胞類型和應用的非病毒轉染方案。Cocoon®平臺是實現大規模自動化生產的新工具,它可以實現細胞分離、激活、轉導、擴增、細胞清洗和收獲,同時提供整個過程中的實時生物反饋 -
Revvity IVIS活體成像助力納米抗體的靶點篩選及開發
在復發性和難治性B細胞惡性腫瘤的治療中,應用CD19CAR-T細胞療法取得有效應答,而FDA批準的4種CD19CAR-T細胞產品,在新的隨訪數據中發現,只有30%-50%的患者實現了疾病的長期控制。為了提高B細胞惡性腫瘤的應答率,并將CART細胞的成功轉化到實體瘤,故需對此類治療方法進行優化。國外研究人員在Naturecommunications期刊發表了題為TheIgG4hingewithCD28transmembranedomainimprovesVHH-basedCARTcellstarg -
重組胰蛋白酶研究背景胰蛋白酶是一種可以特異性水解肽鏈中的賴氨酸和精氨酸C‐端肽鍵的絲氨酸蛋白酶。在生物制品生產過程中作為一種重要的生物源性材料,廣泛應用于病毒性疫苗、生物技術產品以及其他醫療產品的生產制造,例如,流感病毒疫苗中病毒顆粒的激活、疫苗生產中動物細胞的傳代培養、胰島素單鏈前體轉化為雙鏈胰島素等。目前國內的疫苗及胰島素生產企業仍然是以動物源性胰蛋白酶(從豬或牛胰腺中分離純化獲得)為主,但會存在生產工藝復雜、潛在的人畜共患性病原污染的風險。近年來,由于生產過程中使用動物源性胰蛋白酶導致生物

