一、試劑基本信息
英文名稱:IA-DNP-PEG-NHS,Iodoacetate-DNP-PEG-Succinimide ester,IA-DNP-PEG-SE,Iodoacetate-DNP-PEG-NHS ester,Iodoacetate-DNP-PEG-SE
二、核心優勢
雙正交反應性:IA端與巰基、NHS端與氨基的反應條件正交,允許分步、可控的偶聯策略,避免交叉干擾。
模塊化設計:集成標記(IA)、報告/淬滅(DNP)、連接(PEG)、再連接(NHS)四大功能,支持復雜生物化學體系的構建。
高靈敏度檢測:DNP/抗DNP系統背景低,結合多級放大效應(如一個DNP標記分子可結合多個抗DNP-IgG),顯著提升檢測靈敏度。
生物相容性優化:PEG鏈減少分子間聚集,提升光穩定性及化學穩定性,同時降低免疫原性。
三、試劑詳細信息
分子量:0.4k,0.6k,1k,2k,3.4k,5k,10k(可定制)
規格:1g、5g、10g(可按需包裝)
純度:95%+
試劑性狀:由分子量決定,液體或者固體
溶解性:溶于部分有機溶液,溶于水。
供應商:西安凱新生物科技
儲存條件:不超-20℃干燥、避光儲存;不可反復凍融,現配現用!
注意事項:該試劑僅用于科研,不可用于診療。
四、 典型應用場景
1.抗原構建:通過IA端標記目標蛋白A的巰基,再通過NHS端連接載體蛋白B(如BSA、KLH)或酶標板,生成“蛋白A-(IA-PEG-DNP)-蛋白B/表面"復合物,用于免疫檢測。
2.熒光探針設計:
蛋白酶活性探針:合成含目標蛋白酶切割位點的多肽底物,一端用IA端連接熒光素(如FITC),另一端用NHS端連接DNP。完整狀態下熒光被淬滅,酶切后熒光恢復,實現實時監測。
FRET探針:通過調節PEG長度優化供體(熒光團)與淬滅體(DNP)的距離,實時監測生物分子相互作用或構象變化。
3.材料表面修飾:
無機材料:通過NHS端連接氨基化材料表面,實現PEG化修飾,提高生物相容性。
有機材料:通過IA端錨定巰基化表面,再通過NHS端連接功能分子(如熒光染料、生物素),構建穩定界面層。
4.多功能化改造:利用IA端標記蛋白質特定位點(巰基),再通過NHS端連接其他功能分子(如另一種熒光染料、藥物),實現蛋白質的多功能化。
五、 操作注意事項
反應順序:建議先使用IA端進行巰基的定點標記,純化后再使用NHS端進行第二步反應,以避免交叉干擾。
溶解性:需用無水DMSO配制儲存液,避免水導致NHS酯提前水解。
避光保存:DNP基團對光敏感,需避光操作以防止降解。
儲存條件:-20℃以下冰凍、干燥保存,避免反復凍融。
六、相關試劑
FMOC-PEG-SVA
Amine-PEG-Lipoic acid
COOH-PEG-HMME
Thiol-mPEG
VA-PEG-Nitrilotriacetic acid
8-Arm PEG-Tosylate
Acid-PEG-Silane
Acid-PEG-Folic acid
mPEG-Cyanur
Thiol-PEG-Poly-Arginines
Chloride-PEG-Chloride
OPSS-PEG-Sodium Alginate
Fmoc-NH-PEG-OH
Bis-PEG8-NHS ester
HO-PEG-PtBA
本文由西安凱新生物科技小華編輯整理分享。
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