【試劑參數】
英文名稱:FITC Dextran,Fluorescein Dextran,Fluorescein Isothiocyanate Dextran
中文名稱:異硫氰酸熒光素標記葡聚糖,熒光素異硫氰酸酯-葡聚糖
CAS:60842-46-8
Emission (Em):525
Excitation (Ex):488
分子量:4k,7k,10k,40k,70k,500k等
顏色性狀:黃色到棕色固體
供應商:西安凱新生物科技
結構式:

一、化學本質與結構特性
FITC Dextran是異硫氰酸熒光素(FITC)與葡聚糖(Dextran)通過共價鍵結合形成的熒光標記化合物。其核心結構由兩部分組成:
FITC基團:作為綠色熒光探針,激發波長492-495 nm,發射波長520-525 nm,熒光強度受pH和離子強度影響顯著,在堿性環境(pH>8)下熒光強度最大。
葡聚糖骨架:由α-1,6糖苷鍵連接的葡萄糖單元組成,分子量范圍廣泛(4 kDa至2000 kDa),具有優異的水溶性、低免疫原性和化學惰性,可避免內源性糖苷酶的降解。
二、關鍵性能參數
1.分子量多樣性:
低分子量(4 kDa、10 kDa):適用于細胞內吞、細胞膜滲透性研究。
中分子量(40 kDa、70 kDa):常用于血腦屏障通透性評估。
高分子量(150 kDa、500 kDa):模擬大分子物質在體內的轉運行為。
2.標記效率:每個葡萄糖單元的FITC替換率為0.002-0.010 mol,確保葡聚糖結構最小化改變,維持其生物功能。
3.穩定性:在生理緩沖液中37℃下穩定3天以上,pH 4-9范圍內熒光強度變化可控,支持長時間實驗觀測。
三、核心應用領域
1.細胞生物學研究:
細胞膜通透性:通過Transwell模型量化細胞旁滲透率,評估細胞單層完整性。
內吞作用追蹤:利用低分子量FITC Dextran(如4 kDa)標記細胞內吞過程,結合熒光顯微鏡觀察動態變化。
細胞間連接研究:分析細胞間隙連接(Gap junctions)和細胞質橋(Cytoplasmic bridges)的通透性。
2.微循環與組織屏障功能:
血腦屏障(BBB)模型:通過熒光分光光度計測定腦脊液中FITC Dextran濃度,評估BBB通透性損傷。
毛細血管通透性:在體顯微熒光成像技術下,觀察FITC Dextran在血管外的滲漏情況。
3.生物材料與藥物遞送:
示蹤劑開發:作為模型化合物優化藥物載體設計,例如研究水凝膠和脂質體的藥物釋放動力學。
流體動力學分析:通過熒光相關光譜(FCS)測定細胞質基質的黏彈性參數。
四、實驗操作規范
1.樣本制備:
溶解:FITC Dextran易溶于水或鹽溶液,超聲助溶可提高高濃度樣本的均勻性。
濃度優化:根據分子量調整工作濃度(通常0.1-10 mg/mL),避免高濃度導致的熒光自淬滅。
2..檢測方法:
熒光顯微鏡:使用GFP濾光片組(Ex 470-490 nm/Em 505-550 nm)觀察細胞或組織中的熒光分布。
流式細胞術:通過FITC通道(Ex 488 nm/Em 525 nm)定量分析細胞標記效率。
熒光分光光度計:測定樣本熒光強度,結合標準曲線計算滲透率或濃度。
3.避光操作:FITC對光敏感,實驗全程需使用鋁箔包裹容器或暗室操作,防止熒光衰減。
五、15種相關試劑名稱(不展開介紹)
TRITC-Dextran(羅丹明標記葡聚糖)
Cy5.5-Dextran(近紅外熒光標記葡聚糖)
FITC-Lysine-Dextran(賴氨酸穩定化修飾葡聚糖)
Dextran Methacryloyl(甲基丙烯酰化葡聚糖)
Fluorescein-Conjugated Albumin(熒光素標記白蛋白)
Rhodamine B Isothiocyanate(羅丹明B異硫氰酸酯)
Cascade Blue Dextran(級聯藍標記葡聚糖)
Alexa Fluor 488-Dextran(Alexa 488標記葡聚糖)
FITC-Dextran Sulfate(熒光素標記葡聚糖硫酸酯)
Biotinylated Dextran(生物素化葡聚糖)
FITC-Chitosan(熒光素標記殼聚糖)
Dextran T-500(分子量500 kDa葡聚糖)
FITC-Dextran 10K(分子量10 kDa葡聚糖)
FITC-Dextran 40K(分子量40 kDa葡聚糖)
FITC-Dextran 70K(分子量70 kDa葡聚糖)
六、未來研究方向
多模態成像探針:開發同時攜帶熒光和磁性標記的葡聚糖衍生物,實現MRI與熒光成像的聯用。
智能響應型載體:設計pH或酶敏感的FITC Dextran衍生物,用于靶向釋放和動態示蹤。
單分子檢測技術:結合超分辨顯微鏡(如STED或PALM),解析FITC Dextran在亞細胞結構中的分布規律。
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