細胞色素C-異硫氰酸熒光素(FITC-Cytochrome C)是一種通過共價鍵將熒光染料異硫氰酸熒光素偶聯至細胞色素C蛋白上的生物大分子復合物。該試劑利用FITC的高量子產率與細胞色素C的生物活性保留特性,為細胞生物學研究提供了高效的示蹤手段。其核心在于通過異硫氰酸酯基團與蛋白質表面的伯氨基發生親核取代反應,形成穩定的硫脲鍵,從而實現對線粒體電子傳遞鏈關鍵組分的可視化檢測。
英文名稱:Fluorescein Isothiocyanate Cytochrome C, FITC-Conjugated Cytochrome C, Cytochrome C-FITC
分子式:C27H23N2O6(蛋白部分) + C20H10O5(FITC部分)
分子量:根據偶聯度不同約為12000-15000 Da
FITC分子含有一個熒烷酮核心結構,在特定波長光照下能產生強烈的綠色熒光。細胞色素C作為一種可溶性血紅素蛋白,其表面富含賴氨酸殘基,為偶聯反應提供了多個位點。這種偶聯結構既保持了血紅素輔基的電子轉移能力,又引入了光學檢測信號。結構穩定性依賴于緩沖體系的pH值,通常在弱堿性環境下偶聯高,而在中性生理緩沖液中保存性能最佳。
該試劑廣泛應用于線粒體膜電位監測、細胞凋亡早期標志物檢測以及蛋白質相互作用研究。在流式細胞術中,可用于區分活細胞與死細胞,因為完整的線粒體膜電位能維持FITC標記物的定位。此外,它還常作為對照試劑用于免疫熒光染色技術的優化,幫助研究人員評估抗體滲透性和非特異性結合情況。
具備高熒光亮度與低背景噪音的雙重優勢。由于細胞色素C本身具有特定的亞細胞定位特性,該試劑能精準指示線粒體分布。相比其他非特異性熒光探針,其生物相容性更好,對細胞生理狀態的干擾極小。穩定的硫脲鍵連接確保了在多次洗滌和固定過程中熒光信號的完整性,提高了實驗數據的重現性。
使用前需用無碳酸氫鈉的PBS或磷酸緩沖液重新懸浮。避免強光直射細胞色素C-異硫氰酸熒光素,FITC-CytochromeC,建議在4°C避光保存,有效期通常為一年。凍融循環會導致蛋白變性及熒光淬滅,因此應分裝保存。配制后的工作液應在24小時內使用完畢,以確保偶聯分子的生物活性不被破壞。
細胞色素C-藻紅蛋白、FITC標記牛血清白蛋白、羅丹明B標記細胞色素C、FITC標記IgG、Cy3標記細胞色素C、FITC標記葡聚糖、FITC標記鏈霉親和素、FITC標記凝集素、FITC標記透明質酸、FITC標記膠原蛋白、FITC標記纖維蛋白原、FITC標記轉鐵蛋白、FITC標記胰島素、FITC標記白蛋白、FITC標記酪蛋白、FITC標記乳清蛋白、FITC標記谷蛋白、FITC標記酪蛋白酸鈉、FITC標記明膠、FITC標記殼聚糖
注:該試劑僅用于科學研究,不能用于人體實驗或其他治療型用途。
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