靳瀾HLB固相萃取小柱,采用聚苯乙烯/二乙烯苯共聚填料制備而成,表面同時帶有親水性與疏水性基團,對血漿中酸性、中性、堿性各類小分子藥物及其代謝物都能實現均衡吸附,適配生物樣本這類高內源性雜質復雜基質的提取需求。這款產品的pH使用范圍覆蓋1.0~14.0,無論處理酸性、中性還是堿性的血漿提取液,填料結構都不會發生任何變化,不會出現硅膠柱在不同pH環境下性能波動的問題,保證不同性質藥物的回收率都能保持穩定。
它的吸附容量和載樣量是常規C18鍵合硅膠柱的3-10倍,很多在C18柱上難以保留的強極性藥物代謝物,在靳瀾HLB小柱上依然能獲得理想的回收率,不會出現痕量代謝物流穿損失的情況。產品核心參數表現優異:比表面積600 m2/g,平均粒徑40 µm,平均孔徑300 ?,大比表面積帶來了更高的樣品載量,即使處理1mL的高濃度血漿樣本,也不會出現填料過載,洗脫曲線非常穩定,所有目標藥物都能集中被洗脫出來,不會出現拖尾分散的問題。同時填料粒徑分布極窄,細小顆粒占比極低,使用過程中不會被血漿中的磷脂、蛋白沉淀堵塞篩板,過柱流速更快更均勻,即使是新手操作,也能輕松獲得穩定的實驗結果。
在臨床藥代動力學研究、治療藥物監測領域,血漿樣本基質極其復雜,含有大量蛋白、磷脂、膽紅素等內源性干擾物,常規蛋白沉淀法得到的待測液雜質多,極易造成質譜離子源污染,影響檢測結果的準確性。靳瀾HLB 200mg/6mL固相萃取小柱憑借親水親脂平衡的特性,可同時對血漿中的酸性、中性、堿性小分子藥物及其代謝物實現均衡保留,有效去除磷脂等強干擾內源性物質,得到高純凈度的待測液。該款小柱不怕干柱的特性,大幅降低了生物樣本前處理的操作門檻,即使實驗過程中不慎出現小柱流干的情況,也不會影響最終的回收率,避免了珍貴臨床樣本的浪費。
血漿樣本的標準提取凈化操作流程如下:首先進行樣本預處理,準確移取1mL血漿樣本,加入3mL pH 7.0磷酸鹽緩沖液稀釋,充分渦旋混勻,10000rpm離心5分鐘去除沉淀的蛋白,得到待凈化上清液;隨后進行HLB小柱活化,依次用6mL甲醇、6mL純水完成小柱的活化平衡,將預處理后的血漿上清液以2mL/min的流速緩慢上樣,目標藥物及代謝物被填料充分吸附,大部分極性內源性雜質隨流出液排出;上樣完成后,依次用5mL 5%甲醇水溶液淋洗去除極性雜質,再用5mL正己烷淋洗去除血漿中的油脂和磷脂,抽干小柱中的殘留溶劑;最后用5mL甲醇洗脫全部目標物,收集洗脫液后45℃氮吹至干,用1mL 初始流動相復溶,過0.22μm濾膜后即可供LC-MS/MS進行定量分析。
實際應用中,該方法處理血漿樣本后,磷脂去除率達到99%以上,各類小分子藥物的回收率穩定在92%-98%之間,基質效應小于10%,滿足生物樣本分析的相關規范要求。相較于傳統的液液萃取方法,靳瀾HLB小柱的使用大幅減少了有機試劑的使用量,單樣前處理時長縮短50%,目前已被多家醫院臨床檢驗中心、藥物研發CRO公司納入生物樣本分析的常規前處理方案,為臨床治療藥物監測和新藥研發中的藥代動力學研究提供了穩定可靠的技術保障。
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