ELISA樣本處理?不同類型ELISA樣本處理方法比較

　　不同類型的ELISA樣本處理方法存在明顯差異，規(guī)范的前處理是保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確的前提，以下是各類常見樣本的處理要點(diǎn)和對(duì)比說明，僅參考：

　　一、不同類型樣本的處理方法

　　血清樣本?

　　作為ELISA常用的樣本，采集后需室溫放置1-2小時(shí)或4℃過夜讓血液自然凝固，之后在2-8℃條件下以1000-3000×g離心10-20分鐘，小心收集上層血清，避免吸入沉淀。處理全程要嚴(yán)格避免溶血，防止紅細(xì)胞釋放的過氧化物酶類物質(zhì)造成非特異性顯色，引發(fā)假陽性結(jié)果。

　　血漿樣本?

　　需使用含對(duì)應(yīng)抗凝劑的采血管收集全血，采集后30分鐘內(nèi)立即在2-8℃條件下以1000×g離心15分鐘，分離得到血漿。

　　細(xì)胞培養(yǎng)上清?

　　將收集到的上清液移入離心管，在2-8℃條件下以1000×g離心20分鐘，去除懸浮的細(xì)胞碎片和雜質(zhì)，收集澄清上清即可，可直接檢測(cè)或分裝凍存。

　　組織勻漿樣本?

　　先用預(yù)冷的PBS緩沖液沖洗新鮮組織去除殘留血液，稱重后剪為碎塊，按1g組織搭配9mL預(yù)冷PBS的比例添加緩沖液，在冰浴環(huán)境下充分勻漿，之后以5000×g離心5-10分鐘，收集上層澄清勻漿液，部分實(shí)驗(yàn)需額外測(cè)定總蛋白濃度來校正數(shù)據(jù)。

　　其他特殊樣本?

　　尿液、腦脊液、胸腹水：無菌收集后以1000-3000×g離心15-20分鐘，取上清即可檢測(cè)，避免樣本久置析出結(jié)晶干擾結(jié)果。

　　唾液、糞便：唾液以4000×g離心10分鐘取上清;糞便按1:9比例加入PBS振蕩混勻后，以5000×g離心5-10分鐘取上清，去除固體雜質(zhì)。Elisa試劑盒

　　二、不同樣本處理方法差異對(duì)比

　　三、通用要點(diǎn)

　　所有樣本處理后都建議按單次使用量分裝，短期1-2天可2-8℃冷藏，長(zhǎng)期保存需置于-20℃(1個(gè)月內(nèi))或-80℃(超過1個(gè)月)環(huán)境，?嚴(yán)禁反復(fù)凍融?，凍融超過3次會(huì)導(dǎo)致蛋白變性降解，大幅降低檢測(cè)準(zhǔn)確性。同時(shí)要避免樣本中混入(NaN?)，該物質(zhì)會(huì)抑制HRP酶活性，直接引發(fā)假陰性結(jié)果。

　　注：以上科研產(chǎn)品資料供參考，具體可咨詢技術(shù)老師!

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