隨著 2025 版《中國藥典》通則 9628《無菌藥品包裝系統(tǒng)密封性指導原則》全面實施，無菌制劑包裝密閉完整性（CCI/CCIT）正式進入規(guī)范化核查階段。大量藥企在產品注冊、GMP 飛檢、穩(wěn)定性研究中面臨同一個難題：單純依靠真空衰減等物理檢漏僅能檢出物理泄漏，無法直接證明包裝阻隔微生物入侵的實際能力。

藥典明確提出：當理化檢測方法靈敏度無法覆蓋產品最大允許泄漏限度（MALL）時，需至少采用兩種檢測方法開展驗證，微生物挑戰(zhàn)法（浸沒式）作為阻菌屏障驗證的核心佐證手段，成為注射劑、凍干粉、醫(yī)美預充針、疫苗等高風險無菌制劑的試驗項目。

一、微生物挑戰(zhàn)法核心定位，區(qū)分物理檢漏與阻菌驗證

很多企業(yè)容易形成誤區(qū)：真空衰減檢漏合格 = 包裝不會發(fā)生微生物侵入。實際二者存在本質區(qū)別：

真空衰減法：檢測包裝是否存在氣體通道，屬于定量物理篩查，適合日常生產線抽檢、快速無損檢測；

微生物挑戰(zhàn)法：模擬真實污染場景，驗證包裝能否阻擋微生物穿透，是評估無菌風險的法規(guī)佐證金標準，多用于方法學驗證、包裝變更研究、注冊申報資料支撐。

兩種方法互為補充，也是當前藥監(jiān)機構審評、現(xiàn)場核查普遍認可的組合驗證方案。濟南米萊儀器結合藥典 9628 附錄 7 技術要求，打造適配無菌制劑全套微生物挑戰(zhàn)密封性實操解決方案，覆蓋試驗設備、工裝定制、參數方案、方法學技術支持。

二、微生物挑戰(zhàn)法試驗原理（浸沒式）

微生物挑戰(zhàn)試驗依托壓差誘導侵入原理，完整模擬藥品生產滅菌、倉儲溫度波動、長途運輸高低海拔帶來的壓力變化：

待測包裝內部灌裝促生長培養(yǎng)基，模擬實際藥品內容物；

將樣品浸沒在高濃度標準挑戰(zhàn)菌懸液內；

儀器自動執(zhí)行預設真空、正壓交變循環(huán)，消除漏道內滯留空氣，促使菌液充分接觸包裝潛在泄漏縫隙；

完成壓力暴露后取出樣品，消毒樣品外表面，避免外壁殘留菌液造成假陽性；

恒溫條件持續(xù)培養(yǎng)，觀察包裝內部培養(yǎng)基是否出現(xiàn)微生物生長。

若培養(yǎng)基檢出菌體，證實包裝存在可供微生物侵入的泄漏通道，密封系統(tǒng)不滿足無菌防護要求。

三、藥典 9628 標準下標準化實操流程

1、試驗前期準備

樣品：西林瓶、預灌封注射器、輸液軟袋、卡式瓶等；同步制備陽性對照（標準激光打孔樣品）、陰性空白樣品，驗證整套試驗體系有效性。

菌液：選用缺陷短波單胞菌等藥典推薦菌株，配置菌懸液濃度≥10? CFU/mL；

介質：胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB），保證微生物可穩(wěn)定增殖。

2、儀器加載與壓力挑戰(zhàn)

將樣品整齊放置于米萊微生物挑戰(zhàn)密封試驗儀無菌測試艙，浸沒菌液；

設置交變壓力參數（負壓保壓→泄壓恢復常壓，可依據產品運輸工況自定義參數與時長），儀器全自動完成整套壓力循環(huán)，無需人工值守。

3、后處理與培養(yǎng)判定

試驗結束，取出樣品，無菌操作擦拭、表面滅菌；將樣品放置培養(yǎng)箱培養(yǎng) 7～14 天；

結果判定：陰性對照組全部無菌生長、陽性對照組穩(wěn)定檢出微生物，本次試驗有效；待測樣品內部培養(yǎng)基渾濁長菌，判定密封存在缺陷。

四、濟南米萊微生物挑戰(zhàn)密封性測試儀核心優(yōu)勢

微生物挑戰(zhàn)法密封性測試儀

匹配藥典 9628 規(guī)范，支持注冊申報資料輸出

設備按照通則 9628 附錄 7 浸沒式微生物挑戰(zhàn)法設計，壓力精準可控，試驗參數可完整溯源；數據自動存儲，分級權限管理，滿足 GMP、數據完整性要求，試驗報告可直接用于藥包關聯(lián)審評、產品注冊、第三方 CNAS 檢測。

全自動交變壓力控制，杜絕人工操作誤差

支持正壓、負壓、多循環(huán)壓差程序自定義，精準模擬特殊運輸環(huán)境；壓力閉環(huán)控制，壓力波動小，穩(wěn)定激發(fā)微小泄漏通道，大幅提升缺陷檢出可靠性，規(guī)避靜態(tài)測試漏檢風險。

模塊化無菌試驗艙，適配多品類無菌包裝

可更換定制內腔工裝，兼容硬質西林瓶、安瓿瓶、預充式玻尿酸注射器、非 PVC 輸液袋、無菌泡罩包裝、透析紙滅菌袋等多種樣品；腔體鏡面拋光，易清洗滅菌，適配潔凈實驗室使用。

有效規(guī)避假陽性、假陰性難題

配套防溢流結構、樣品限位支架，防止樣品上浮、傾倒；壓力速率平緩可調，避免包裝形變造成誤判；配套完整 SOP 參考方案，米萊技術團隊可提供參數優(yōu)化、方法學驗證技術支持。

一機兼顧方法比對，搭建 CCIT 完整質控體系

可與米萊真空衰減法泄漏檢測儀配套使用，幫助企業(yè)搭建「日常無損抽檢（真空衰減法）+ 定期阻菌驗證（微生物挑戰(zhàn)法）」雙重質控體系，輕松滿足藥典 9628 組合驗證要求。

五、主流適用行業(yè)與樣品

? 注射用凍干粉針西林瓶包裝密封性驗證

? 醫(yī)美交聯(lián)透明質酸鈉預充針、卡式瓶阻菌測試

? 大輸液軟袋、BFS 吹灌封無菌包裝研究

? 疫苗、血液制品無菌包裝系統(tǒng)開發(fā)

? 無菌醫(yī)療器械透析紙包裝袋完整性試驗

? 藥包材企業(yè)包裝型式檢驗、包裝相容性配套研究

六、總結落地建議

對照 2025 藥典 9628 新規(guī)，無菌制劑企業(yè)應當盡快梳理包裝密封性研究方案：新品研發(fā)階段完成物理檢漏法與微生物挑戰(zhàn)法相關性驗證；商業(yè)化生產建立常態(tài)化密封性抽檢機制。

單一檢測手段難以應對日益嚴格的核查要求，真空衰減無損檢測搭配微生物挑戰(zhàn)阻菌驗證，是當前合規(guī)路徑。

濟南米萊儀器可根據樣品材質、包裝規(guī)格，提供專屬試驗工裝、參數方案調試、現(xiàn)場技術指導，為藥企、藥包材企業(yè)、第三方檢測機構提供整套包裝密封性 CCIT 解決方案。