制藥企業面臨著一個關鍵難題：如何在提高細菌內毒素檢測可靠性和降低風險的同時，應對緊迫的可持續發展問題和不斷變化的供應鏈挑戰。幾十年來，源自鱟血的傳統鱟試劑檢測一直是細菌內毒素檢測的金標準，用于確保產品安全。然而，隨著行業的不斷發展，其優先事項也在發生變化 — 每年進行超過8000萬次內毒素檢測，其中絕大多數依賴于鱟試劑。隨著人們對環境管理意識的增強以及制藥行業對無動物實驗方法的承諾，尋求更可持續的替代方案已成為一種趨勢。重組C因子試劑（rFC）和重組級聯試劑（rCR）的出現，為兼顧可靠性和可持續性提供了一種具吸引力的解決方案。這些合成替代方案無需使用動物源性材料，同時與傳統的鱟試劑相比，在準確性、重現性和特異性方面均有所提升。然而，這些重組技術的成功應用需要進行全面的驗證，尤其要重視針對本土微生物的測試。本文探討了在過渡到重組試劑時評估本土微生物的重要性，這有助于生產商實現降低風險和可持續發展的目標。

重組C因子（rFC）是一種基于終點熒光法的檢測方法，它利用單一重組蛋白克隆 — C因子 — 來檢測細菌內毒素。該檢測方法需在設定的時間內進行孵育，并在檢測開始和結束時進行讀數。當存在內毒素時，熒光讀數儀會放大熒光底物的信號。由于rFC僅包含C因子克隆而非完整的信號級聯，因此它無法檢測β-葡聚糖。

相比之下，重組級聯試劑（rCR）基于吸光度動力學檢測，能更精確地模擬傳統的鱟試劑級聯反應。rCR使用與現有鱟試劑相同的儀器，并隨時間進行多次讀數。rCR檢測利用重組C因子、重組B因子和重組凝固酶原來模擬天然酶促級聯反應。這種動態顯色法通過隨時間進行多次讀數來測量顏色變化，與傳統的動態顯色鱟試劑方法類似。