詳細介紹
HT-1080 LifeAct穩定細胞系
HT-1080 LifeAct穩定細胞系
應用領域
- 活細胞成像的細胞骨架組織和動力學
- 基于細胞的功能性測定,例如趨化性和遷移
- 在實驗中可用作特征對照
為了創建穩定的LifeAct-TagGFP2表達細胞系,用編碼TagGFP2標記的LifeAct的質粒穩定轉染人纖維肉瘤細胞。
請在此處找到有關LifeAct的詳細信息。
HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞具有高度動態的絲狀肌動蛋白。通過穩定的LifeAct表達,可以實現具有極低背景熒光的絲狀肌動蛋白的可視化。此外,對細胞的*表征表明它們顯示出與野生型(wt)細胞相同的行為。
由于細胞系的快速生長和接觸抑制的缺乏,它構成了理想的腫瘤模型。這些特征與明亮且特異的F-肌動蛋白染色相結合,形成了一種功能*的工具,可廣泛應用于活細胞成像和高內涵方法。
技術特點
- 同類細胞池
- 保證細胞系身份
- 純度測試
- 顯微鏡檢測的轉基因表達
技術指標
| 細胞/小瓶 | 5 x 10 5 |
| 介質 | ibidi冷凍培養基 |
| 存儲 | 液氮 |
| 生物安全等級 | 1個 |
| 不育性 | 測試酵母和細菌, 包括支原體 |
| 發起人 | CAG(修飾的雞β-肌動蛋白) |
| 轉基因 | LifeAct-TagGFP2 * |
產地信息
| 生物 | 智人(人類) |
| 資源 | 結締組織病:纖維肉瘤 |
| 年齡 | 35歲 |
| 性別 | 男 |
| 種族 | 高加索人 |
| 生長特性 | 附著的 |
| 形態學 | 上皮的 |

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請在此處找到有關肌動蛋白可視化的更多詳細信息。
在此處下載完整的“ Actin可視化”應用指南,以PDF格式。
HT-1080 LifeAct-TagGFP2的基本表征
基因組表征:
通過短串聯重復序列(STR)分析對人類細胞系進行基因組認證,已廣泛用于確保細胞系的同一性和研究細胞系的純度。
人類基因組中的短串聯重復多態性用于區分個體。通過鑒定基因組中典型位置的特定序列的短重復序列,有可能創建單個人類(如法醫所用)或細胞系的遺傳圖譜。
使用上述方法分析了ibidi的HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞。該分析是由DSBZ(一家經過ISO認證的萊布尼茲研究所)進行的。分析顯示,HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞與HT-1080野生型細胞相同。

細胞增殖分析:
使用與培養起點相同的定義條件,將HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞培養8天,然后每天分析細胞數。
該實驗的結果表明,兩種細胞系在預定的時間內均以相同的速率生長。使用統計檢驗證實了該結果。

細胞群體的熒光強度:
使用流式細胞儀分析了HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞的熒光強度和陽性細胞數。
與野生型細胞相比,至少95%的細胞具有熒光,平均熒光強度有兩個對數偏移。

HT-1080 LifeAct-TagGFP2的功能表征
趨化性2D和3D
HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞的化學趨化分析在µ-Slide化學趨化分析中進行了分析,使用胎牛血清(FCS)作為化學引誘劑(更多詳細信息,請參見應用筆記17)。
這些測定的結果表明,HT-1080 LifeAct-TagGFP2細胞以與野生型細胞相同的速度和正向遷移指數(FMI)遷移。這些結果使用學生t檢驗進行了確認。p <0.05被認為是顯著的。

傷口愈合:
將HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞接種在與Culture-Insert結合的µ-Slide 8 孔中。經過24小時的視頻顯微鏡檢查后,使用WimScratch自動化軟件解決方案分析了傷口閉合情況。
HT-1080 LifeAct-TagGFP2和野生型細胞顯示出相當的細胞前沿速度。這些結果使用學生t檢驗進行了確認。p <0.05被認為是顯著的。
注:楊清辰發布
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