Overlay IFNg (green)是指熒光ELISPOT實(shí)驗(yàn)中將IFN-γ綠色熒光通道圖像與其他通道圖像進(jìn)行疊加分析的技術(shù)。這一技術(shù)是FluoroSpot實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析中的核心環(huán)節(jié)，通過(guò)將不同熒光通道的圖像進(jìn)行精確的空間疊加，研究人員能夠識(shí)別共表達(dá)多種細(xì)胞因子的多功能細(xì)胞，深入分析T細(xì)胞的功能異質(zhì)性和免疫應(yīng)答的復(fù)雜性。Overlay IFNg (green)技術(shù)的應(yīng)用使研究人員能夠從單細(xì)胞水平上理解免疫應(yīng)答的多樣性。

BIOREADER®設(shè)備的軟件系統(tǒng)支持多色熒光圖像的疊加分析，能夠?qū)⒕G色I(xiàn)FN-γ通道的圖像與其他通道（如紅色I(xiàn)L-2通道、遠(yuǎn)紅色TNF-α通道等）進(jìn)行精確疊加。疊加分析的第一步是圖像配準(zhǔn)，軟件通過(guò)識(shí)別不同通道圖像中的共同特征點(diǎn)，計(jì)算圖像之間的空間變換參數(shù)，實(shí)現(xiàn)像素級(jí)別的精確對(duì)齊。配準(zhǔn)精度可達(dá)亞像素級(jí)別，確保不同通道之間的位置對(duì)應(yīng)關(guān)系準(zhǔn)確無(wú)誤。完成配準(zhǔn)后，軟件將不同通道的圖像疊加顯示，研究人員可以直觀地觀察每個(gè)細(xì)胞在不同通道中的熒光信號(hào)。

在疊加分析的基礎(chǔ)上，BIOREADER®軟件能夠自動(dòng)識(shí)別和分類不同類型的細(xì)胞。軟件能夠統(tǒng)計(jì)單陽(yáng)性細(xì)胞（只分泌IFN-γ的細(xì)胞）、雙陽(yáng)性細(xì)胞（同時(shí)分泌IFN-γ和IL-2的細(xì)胞）和多陽(yáng)性細(xì)胞（同時(shí)分泌三種或以上細(xì)胞因子的細(xì)胞）的數(shù)量和比例。這些數(shù)據(jù)對(duì)于評(píng)估T細(xì)胞的功能質(zhì)量具有重要價(jià)值，高比例的多功能性T細(xì)胞通常與更好的免疫保護(hù)和治療效果相關(guān)。在疫苗免疫應(yīng)答評(píng)估中，多功能T細(xì)胞的比例被認(rèn)為是比單一細(xì)胞因子檢測(cè)更可靠的免疫保護(hù)相關(guān)性指標(biāo)。

Overlay IFNg (green)疊加分析技術(shù)在腫瘤免疫zhi療監(jiān)測(cè)中具有重要應(yīng)用。通過(guò)分析患者外周血中腫瘤特異性T細(xì)胞的多功能性，醫(yī)生可以更全面地評(píng)估免疫zhi療的效果。在疫苗研發(fā)中，該技術(shù)用于評(píng)估疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞應(yīng)答質(zhì)量。

代表性產(chǎn)品型號(hào)： BIOREADER® 7000-F