使用抗生素熒光定量檢測儀時,為確保檢測結果的準確性和儀器的正常使用,需注意以下事項:
一、儀器使用前的準備
1、環境要求
萊恩德抗生素熒光定量檢測儀應放置在平穩、水平的臺面上,避免陽光直射和腐蝕性氣體。
工作臺面需承載10kg以上重量,周圍留有10cm以上空間,便于操作和維護。
實驗室溫度建議穩定在18-25℃(部分儀器要求20-25℃),濕度過高時需開啟空調除濕,防止光學部件冷凝。
2、儀器狀態檢查
檢查儀器各部件是否齊全、完好,如有損壞及時更換或維修。
清潔儀器表面,用無絨布蘸取70%乙醇擦拭樣品艙,清除灰塵和殘留液體。
檢查熱蓋密封圈是否老化或變形,確保加熱模塊邊緣無污垢堆積。
3、試劑與樣品準備
試劑需在有效期內使用,避免過期或保存不當導致活性降低。
樣品需具有代表性,質量良好,必要時進行稀釋或預處理(如核酸提取)。
牛奶等液體樣品需嚴格按照說明書處理,避免基質干擾檢測結果。
二、操作過程中的注意事項
1、參數設置
根據儀器型號設置激發波長、發射波長、積分時間等參數,確保與檢測項目匹配。
實驗涉及復雜梯度溫度(如Touchdown PCR)時,需額外增加3-5分鐘預熱時間,補償溫度波動。
2、樣品加載
使用與儀器兼容的PCR板或管(如0.2ml八聯管),避免尺寸不符導致加熱不均。
96孔板需選擇光學級封板膜,防止預熱時封膜松弛影響密封性。
預熱時放入空PCR板或平衡管,模擬實際負載下的熱傳導狀態,減少孔間溫差。
3、避免污染
操作時需在無菌條件下進行,使用專用移液器,避免樣本、試劑和儀器的交叉污染。
預熱后放入反應體系前,用紫外線照射樣品艙3-5分鐘(部分儀器自帶UV功能),殺滅殘留核酸。
高靈敏度檢測(如ctDNA分析)需同步運行防污染程序,通過dUTP/UNG酶系統消除潛在污染。
4、實時監控
抗生素熒光定量檢測儀需實時監控熒光信號變化,確保在適當循環次數后開始采集數據,避免過早或過晚影響結果。
觀察反應體系狀態,如發現液體滲漏或風扇故障,需立即停止操作并檢查。

三、操作后的維護與保養
1、儀器清潔
實驗結束后,用無絨布擦拭儀器表面,清除試劑殘留。
清潔樣品孔時,可用洗耳球輕輕吹拭灰塵,或用移液槍吸取90%酒精浸泡20分鐘后自然風干。
每月清潔熱蓋內部的橡膠密封圈,防止老化導致密封性下降。
2、定期校準
使用溫度校準試劑盒驗證加熱模塊溫度均勻性,確保各孔溫差≤±0.15℃。
長期未校準(如超過3個月)時,需運行ROI校準程序,調整熒光信號采集區域。
定期檢查儀器軟件版本,及時更新以優化溫控算法和熒光信號處理。
3、部件更換
發現熱蓋密封圈裂痕、光源亮度衰減等異常時,需聯系廠商更換部件。
每季度使用壓縮空氣吹掃散熱風扇,避免灰塵堆積影響制冷效率。
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