小鼠骨髓源巨噬細(xì)胞（BMDM）培養(yǎng)基配方及原理

時(shí)間：2026-4-21閱讀：754

骨髓源巨噬細(xì)胞（BMDM）培養(yǎng)基配方：含伊斯科改良杜氏培養(yǎng)基（IMDM），添加 10% 胎牛血清、100 U/mL 青霉素、100 μg/mL 鏈霉素、10 mM 巰基甘油。

巰基甘油（Thioglycerol）作用

還原性抗氧化劑、巰基供體，和 β- 巰基乙醇（β-ME）功能高度相似，很多巨噬細(xì)胞專(zhuān)用 IMDM 培養(yǎng)基配方統(tǒng)一用它替代。

骨髓原代細(xì)胞、單核細(xì)胞分化巨噬細(xì)胞過(guò)程中本身極易氧化應(yīng)激死亡。巰基甘油自帶游離巰基（-SH），直接清除培養(yǎng)體系內(nèi) ROS，降低氧化損傷，大幅提高原代骨髓細(xì)胞存活率。

細(xì)胞內(nèi)多種代謝酶、分化相關(guān)信號(hào)蛋白需要還原態(tài)環(huán)境才能正常工作；尤其單核→巨噬細(xì)胞分化依賴(lài)的氧化還原穩(wěn)態(tài)，缺了分化效率會(huì)暴跌。

M-CSF 誘導(dǎo)分化 BMDM 時(shí)，骨髓單核細(xì)胞體外很容易凋亡；還原性添加劑可以抗凋亡、延長(zhǎng)細(xì)胞存活時(shí)間，讓更多單核細(xì)胞成功分化為成熟巨噬細(xì)胞。

胎牛血清（FBS）里的生長(zhǎng)因子、脂質(zhì)、維生素長(zhǎng)期培養(yǎng)易被氧化失活；

巰基甘油能保護(hù)血清成分，讓培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)更穩(wěn)定，適合5~7 天長(zhǎng)時(shí)誘導(dǎo)分化 BMDM。

● 常規(guī)干細(xì)胞 / 免疫細(xì)胞：50 μM ~ 0.1 mM β- 巰基乙醇

●BMDM 體系：10 mM 高濃度巰基甘油

屬于巨噬細(xì)胞專(zhuān)用強(qiáng)化還原配方，專(zhuān)門(mén)適配 IMDM 基底培養(yǎng)基，是經(jīng)典骨髓巨噬細(xì)胞培養(yǎng)體系標(biāo)配。

● 骨髓細(xì)胞死亡率升高，復(fù)蘇差、貼壁差

● M-CSF 誘導(dǎo)分化不夠，成熟 BMDM 變少

● 細(xì)胞易自發(fā)應(yīng)激活化，基線炎癥偏高

● 后期極化（M1/M2）、吞噬、胞葬實(shí)驗(yàn)本底紊亂

巰基甘油作為還原性抗氧化物質(zhì)，清除細(xì)胞內(nèi)活性氧、維持氧化還原穩(wěn)態(tài)，減輕骨髓單核細(xì)胞氧化應(yīng)激凋亡，保障 M-CSF 誘導(dǎo)下骨髓源巨噬細(xì)胞的存活與高效分化。