小鼠臨界尺寸顱骨缺損模型（critical-size calvarial defects）是骨再生、骨修復材料及生長因子治療研究中經典、應用廣泛的體內動物模型。臨界尺寸缺損定義為：動物自身無法通過生理性骨修復愈合、終生無法自主閉合的骨缺損尺寸，可排除自身修復干擾，精準評價外源藥物、細胞、支架材料及生長因子的骨再生促進效果。

一、模型基本參數

常規采用6–8周齡C57BL/6小鼠，顱骨正中頂骨區域制備圓形全層骨缺損。小鼠顱骨臨界缺損的標準直徑為3.0–4.0 mm。該尺寸下，小鼠自身骨再生能力無法填補缺損區域，術后8–12周仍存在明顯骨缺損空腔，是評價骨修復療效的標準模型尺寸。

二、模型造模原理

小鼠顱骨骨板薄、血供相對有限、成骨潛能較低，超大臨界尺寸缺損會破壞局部骨膜成骨體系，阻斷內源成骨細胞的遷移與增殖。在無外源性干預條件下，缺損區域僅形成纖維結締組織填充，無法完成骨重塑與骨再生，能夠客觀、真實地反映各類治療手段的骨修復效能，廣泛應用于BMP-2、PDGF-BB等生長因子、免疫調控制劑及組織工程支架的體內藥效驗證。

三、適用研究方向

該模型主要用于驗證：生長因子介導的骨再生修復效果、炎癥微環境對骨修復的抑制作用、免疫調控（巨噬細胞/白介素信號調控）改善骨缺損修復、新型生物材料的骨誘導能力等，適配IL-1受體拮抗、炎癥微環境調控聯合生長因子治療的相關機制與療效研究。

四、模型優勢

造模操作簡單、創傷小、小鼠存活率高、重復性好；缺損自愈率極低，實驗陰性對照穩定；能夠同時檢測骨新生量、骨密度、炎癥浸潤水平，可結合免疫組化、流式細胞術、Micro-CT掃描等多維度指標評價修復效果，是骨再生領域的標準體內評價模型。

骨再生、骨修復模型中，如何研究巨噬細胞的功能? 一個重要的手段就是建立疾病模型，體內給藥使用荷蘭Liposoma的巨噬細胞清除劑氯膦酸鹽脂質體ClodronateLiposomes & Control Liposomes。

氯膦酸鹽脂質體清除小鼠顱骨缺損模型巨噬細胞實驗方案

顱骨缺損模型

用于手術的小鼠為10至12周齡。用異氟烷麻醉小鼠，并剃除頭頂毛發。行縱向切口以暴露顱骨，并通過牽開軟組織暴露骨組織。使用鉆頭在顱骨矢狀縫兩側的頂骨上各制造一個顱骨開窗缺損（直徑4.5 mm）。缺損用生理鹽水沖洗后，用聚合在硬腦膜上方的纖維蛋白基質覆蓋[每缺損40 μl，含纖維蛋白原（14 mg/ml；Enzyme Research Laboratories）、牛凝血酶（4 U/ml；Sigma-Aldrich）、5 mM CaCl?和抑肽酶（25 μg/ml；Roche）]。在特定實驗條件下，基質中還添加了1 μg生長因子及IL-1Ra變體。隨后，用縫線閉合軟組織。作為鎮痛藥，小鼠接受皮下注射麻醉試劑（0.1 mg/kg）。術后8周處死小鼠，并通過顯微計算機斷層掃描（microCT）對顱骨進行分析。