ES2 是一種常用的人卵巢透明細胞癌細胞系。體內成瘤性:該細胞具有致瘤性。根據ATCC的數據,將1×10?個ES2細胞皮下接種到裸鼠體內,21天內100% (5/5) 的受試小鼠會形成腫瘤。
取 5×10?株表達 KTR 探針的 ES2 或 PtD 細胞重懸于 200 μL 磷酸鹽緩沖液(PBS),接種至 6~10 周齡雌性裸鼠(nu/nu,MGH Cox 7 品系)腹腔,構建腹腔播散卵巢癌模型。
活體成像實驗:造模后腫瘤自然生長約 2 周再給藥干預;
藥效生存期實驗:造模后腫瘤生長約 1 周啟動給藥。
CT26 結直腸癌細胞(1×10?個)接種于 6~10 周齡雌性 BALB/c 小鼠(JAX)脅部;YUMMER1.7 黑色素瘤細胞接種于同齡雌性 nu/nu 裸鼠脅部。待腫瘤可明顯觸及后開始給藥;CT26 模型入組時腫瘤平均直徑 7 mm±0.5 mm。
小鼠采用隨機法分入各給藥組,分組時各組小鼠體重無顯著差異。
1.曲美替尼、達拉非尼、馬拉維若口服灌胃
曲美替尼:0.3 mg/kg;溶媒配方:1% 二甲基亞砜(DMSO)+0.5% 甲基纖維素 + 0.2% 吐溫 80 水溶液;
達拉非尼:30 mg/kg,溶媒同曲美替尼;
馬拉維若:30 mg/kg;溶媒配方:5% DMSO+0.5% 0.1 mol/L 稀鹽酸水溶液;
以上藥物均購自 Selleck Chem,采用灌胃給藥。
2.氯膦酸鹽脂質體清除巨噬細胞,巨噬細胞細胞清除劑Clodronateliposomes清除小鼠卵巢癌模型的巨噬細胞方案
氯膦酸鹽脂質體(載藥濃度 5 mg/mL)或空白 PBS 脂質體(Liposoma BV 公司產品),實驗第 1 天腹腔注射 150 μL,此后每 3 天補充注射 50 μL,直至動物達到實驗終點。
3.CSF1R 中和抗體耗竭巨噬細胞
抗小鼠 CSF1R 單克隆抗體(InVivoMAb,克隆號 AFS98,BioXCell)及大鼠 IgG2a 同型對照抗體(克隆 2A3,BioXCell),每只 200 μg 溶于 200 μL PBS;實驗第 1 天起腹腔注射,每 2~3 天給藥一次直至實驗終點。
4.福替尼納米粒(NanoFore)給藥
臨用前用 1×PBS 稀釋:尾靜脈給藥終體積 50 μL,腹腔給藥終體積 200 μL。
腹腔 ES2 卵巢癌模型藥效實驗中,納米制劑等效福替尼劑量為 10 mg/kg;其余所有動物實驗福替尼等效劑量均為 30 mg/kg。
皮下腫瘤每日使用游標卡尺測量。
所有實驗每日觀察小鼠狀態,出現以下任一情況即達到實驗終點,并統計生存期:
① 體態評分≤2 分;
② 腹水或巨大腫瘤導致活動受限、出現疼痛 / 應激表現;
③ 腫瘤直徑超過 1 cm。
腹腔內腫瘤負荷采用 Ami HT 活體熒光成像系統(Spectral Instruments Imaging)進行長時程活體熒光追蹤;配套 Aura 成像軟件定量分析每只小鼠同等大小感興趣區內 ES2 細胞 ERK-KTR 探針總熒光光子通量(光子 / 秒),激發波長 / 發射波長:465 nm/510 nm。

請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,化工儀器網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。