多發性硬化（MS）等神經系統疾病中殘疾的累積，反映了由反復發作的炎性脫髓鞘所引起的軸突損傷和丟失的日益加重。在MS病程早期，這種神經炎癥反應不僅誘發脫髓鞘，還會激活內源性修復機制，介導受損髓鞘的修復，這一過程稱為髓鞘再生。髓鞘再生由少突膠質細胞執行，并具有明顯的階段特征：首先，病變區域內少突膠質細胞前體細胞（OPCs）發生擴增和動員，隨后OPCs分化為成熟的髓鞘形成性少突膠質細胞，并對受累軸突進行髓鞘再生。然而，在進展型MS患者中，髓鞘再生常常失敗，導致慢性脫髓鞘斑塊和膠質瘢痕組織形成。這具有深遠的病理生理后果，因為髓鞘的丟失不僅破壞軸突功能，還通過增加軸突對炎性介質的易感性以及破壞髓鞘化少突膠質細胞所提供的營養支持，損害軸突的結構完整性。

目前對這些疾病中髓鞘再生受阻的確切原因尚不清楚。然而，越來越多的證據表明，這與過度炎癥性微環境以及OPCs自身分化為成熟髓鞘形成性少突膠質細胞的內在能力不足有關。因此，當前促進髓鞘再生的策略包括：刺激中樞神經系統（CNS）內常駐小膠質細胞和外周來源的浸潤巨噬細胞，使其向具有抗炎和修復特征的表型極化。另一種有前景的增強修復策略是直接調控調節OPC分化的信號通路，如富含亮氨酸重復序列和免疫球蛋白樣結構域蛋白1（LINGO-1）、Notch、Wnt以及過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）通路。總體而言，能夠同時影響免疫過程和修復過程的治療藥物，預計將是促進髓鞘再生的策略。

此前，我們已證明根皮素（phloretin）——一種大量存在于草莓和蘋果中的二氫查爾酮類化合物，已知具有免疫調節和抗氧化特性——能夠通過改變吞噬細胞的表型來緩解神經炎癥。在本研究中，我們展示了根皮素在cuprizone誘導的脫髓鞘后也能加速髓鞘再生。通過體外OPC培養和Liposoma清除劑小膠質細胞清除的離體腦片實驗，我們發現增強的髓鞘再生是根皮素直接作用于OPC成熟的結果。分子對接和功能性PPARγ拮抗劑/激動劑實驗進一步表明，根皮素通過作為PPARγ的有效激動劑來刺激OPC分化。由于根皮素同時影響MS的免疫調節和神經退行性兩個方面，它有望成為治療這種脫髓鞘疾病的天然藥物。

用荷蘭Liposoma小膠質細胞/巨噬細胞清除劑clodronate liposomes處理，確實會損害中樞神經系統的髓鞘再生能力。其背后的機制主要涉及以下幾個方面：

1.直接影響髓鞘再生：一項2001年的經典研究發現，在大鼠脊髓的脫髓鞘模型中，使用clodronate liposomes清除巨噬細胞后，少突膠質細胞介導的髓鞘再生在3周時顯著減少。這表明巨噬細胞/小膠質細胞是成功進行髓鞘再生的關鍵參與者。

2.干擾關鍵修復細胞（OPCs）：后續研究進一步揭示了其作用機制。巨噬細胞/小膠質細胞的減少，與少突膠質細胞前體細胞（OPCs）的招募延遲有關。OPCs是分化成成熟少突膠質細胞、執行髓鞘再生的“主力軍"。研究發現，這種效應獨立于髓鞘碎片的清除，提示小膠質細胞可能通過其他信號通路（而非僅僅是“打掃衛生"）來影響OPCs。同時，這種細胞清除還改變了局部胰島素樣生長因子-1（IGF-1）和轉化生長因子β1（TGF-β1）等生長因子的表達，而這些因子對于OPCs的生存和分化至關重要。

3.關鍵的時間窗口：小膠質細胞/巨噬細胞的作用似乎存在一個“關鍵期"。研究發現，如果在脫髓鞘后的早期階段進行清除，髓鞘再生會受損；但如果延遲清除，直到修復過程的后半段再清除，則對最終的修復結果沒有影響。這表明它們主要在啟動和早期階段發揮作用。

氯膦酸鹽脂質體ClodronateLiposomes體外清除腦切片小膠質細胞方案：

清除檢測：

圖. 氯膦酸鹽脂質體在體外和離體環境中均可清除吞噬細胞。

A. 經氯膦酸鹽脂質體或空載脂質體處理的骨髓來源巨噬細胞的存活率，顯示氯膦酸鹽脂質體具有清除巨噬細胞的能力（n=5-6）。

B-C. 離體小腦腦片培養物（BSCs）中F4/80?細胞的代表性圖像及定量分析，顯示氯膦酸鹽脂質體介導的小膠質細胞清除效果（n=9）。比例尺，25 µm。

D. 空載脂質體處理的BSCs與對照BSCs的髓鞘再生指數比較（n=3）。

E. 小膠質細胞清除的BSCs與對照BSCs的髓鞘再生指數比較（n=6）。

Ctrl，對照；phl，根皮素。數據以均值±標準誤表示。p < 0.01（非配對雙尾t檢驗）。

清除表型：

論文信息：

論文題目：Phloretin enhances remyelination by stimulating oligodendrocyte precursor cell differentiation

期刊名稱：PNAS

時間期卷：119 (46) e2120393119

DOI: 10.1073/pnas.212039311

產品信息：

貨號：C-010

規格：10ml

品牌：Liposoma

產地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes

辦事處：靶點科技

Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體體外培養清除小膠質細胞模型里巨噬細胞。荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑ClodronateLiposomes見刊于PNAS：根皮素通過刺激少突膠質細胞前體細胞分化來增強髓鞘再生。

Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸二鈉脂質體清除巨噬細胞的材料和方法：

In vivo macrophage depletion

Cerebellar slices were obtained from C57BL/6JOlaHsd mouse pups at the age of P9 or P10, as described previously (31, 32). To induce demyelination, slices were treated with lysolecithin (LPC; 0.5 mg/mL; Sigma-Aldrich) 3 d after isolation for 16 h. After demyelination, slices were treated daily with phloretin (50 μM) or vehicle for 6 d. For microglia depletion, slices were treated with clodronate or empty liposomes (0.5 mg/mL; LIPOSOMA) immediately after isolation for 24 h. After 3 d, slices were treated with LPC for 16 h followed by daily treatment with phloretin or vehicle.

巨噬細胞清除材料和方法文獻截圖：