用鼠尾膠原蛋白進行膠原收縮測定
ACOX3 功能障礙是頸內動脈復發性自發性血管痙攣的潛在原因
使用的先進 BioMatrix 產品：
RatCol® I 型鼠尾膠原蛋白 (4 mg/ml) 和中和溶液（包含在鼠尾膠原蛋白試劑盒中）
產品的使用方式：
我們的膠原蛋白用于形成 3D 水凝膠，并用 HASMC 播種/嵌入。作為膠原蛋白收縮測定的一部分，每 24 小時測量一次膠原蛋白水凝膠。
文章摘要：
顱外頸內動脈復發性自發性血管痙攣（RSV-eICA）是導致年輕人缺血性卒中的一個鮮為人知的原因。然而，其病理生理學仍然很大程度上未知。通過對受 RSV-eICA 影響的兩個韓國異卵雙胞胎兄弟的 ACOX3 基因進行全外顯子組測序，我們鑒定了兩種復合雜合錯義變異 c.235 T >G (p.F79 V) 和 c.665G>A (p.G222E) ）。計算機分析表明，這兩種變體均被歸類為致病性。體外 ACOX3 酶測定表明 F79 V 和 G222E 突變體實際上沒有酶活性。為了確定突變體對血管痙攣的影響，我們對人主動脈平滑肌細胞（HASMC）進行了膠原收縮測定。
Carbachol 是一種膽堿能激動劑，可誘導 HASMC 收縮。使用 siRNA 敲低 HASMC 中的 ACOX3，可顯著抑制由卡巴膽堿引發的 HASMC 收縮。通過編碼siRNA抗性野生型ACOX3的質粒轉染，卡巴膽堿誘導的HASMC收縮得到恢復，但通過ACOX3 G222E轉染或ACOX3 F79V和ACOX3 G222E共轉染則不能恢復，表明兩種ACOX3突變體抑制卡巴膽堿誘導的HASMC收縮。我們認為 ACOX3 功能障礙會引起基底主動脈肌源張力的長期喪失。結果，頸內動脈中間段的平滑肌（其中交感神經支配特別豐富）變得對擬交感神經刺激（例如劇烈運動）過敏，導致復發性血管痙攣。因此，ACOX3功能障礙可能是RSV-eICA的致病機制。我們第一次報道了 ACOX3 可能參與維持人動脈平滑肌的基礎肌源張力。
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