creative-enzymes 熒光酶的測定

時間：2024/2/29閱讀：1935

Creative Enzymes提供高質(zhì)量的生物分析服務(wù)和合同研究，專門從事酶活性分析，滿足制藥、生物技術(shù)和診斷行業(yè)客戶的需求。多年來，Creative Enzymes一直是熒光酶檢測領(lǐng)域經(jīng)驗(yàn)豐富的公司。我們的測量能力廣泛，涵蓋各種酶，包括氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、水解酶、裂解酶、異構(gòu)酶和連接酶。在解決具體問題、優(yōu)化操作以及酶活性測量方法開發(fā)的過程中，我們始終與客戶密切合作。

熒光是一種發(fā)射現(xiàn)象，其中吸收輻射的波長始終低于發(fā)射（熒光）波長（能量較高）。熒光酶測定利用產(chǎn)物底物熒光光譜的差異來測量酶反應(yīng)（圖 1）。吸收光后，基態(tài) (S ₀ ) 的熒光團(tuán)被激發(fā)到更高能量的單線態(tài)水平。_{在皮秒時間尺度內(nèi)發(fā)生的快速熱化使受激分子處于第一激發(fā)態(tài) (S 1} )的很低振動能級。在系統(tǒng)發(fā)射光子后衰減回到基態(tài)之前，這種激發(fā)單線態(tài)可以保持很短的時間（納秒量級）。由于這種激發(fā)到基態(tài)躍遷的能量通常比激發(fā)過程的能量低，因此發(fā)射的波長通常比激發(fā)的波長更長。這種波長差異稱為斯托克斯位移。實(shí)際上，所有熒光數(shù)據(jù)都可以通過五個參數(shù)之一來描述：激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率、熒光壽命以及發(fā)射的各向異性或偏振。

Perrin-Jablonski 圖。 S0 是基態(tài)，而 S1 和 S2 是電子激發(fā)態(tài)。 圖 1： Perrin-Jablonski 圖。S ₀是基態(tài)，而S ₁和S ₂是電子激發(fā)態(tài)。
參考文獻(xiàn)： Eccleston JF，Hutchinson JP，Jameson D M。藥物化學(xué)進(jìn)展，2005，43：19-48。

熒光測定廣泛用于確定酶反應(yīng)的動力學(xué)機(jī)制，也用于配置高通量篩選的動力學(xué)測定。要使用基于熒光的測定進(jìn)行測量，反應(yīng)需要從非熒光底物形成熒光產(chǎn)物，反之亦然。第一種情況的一個例子是在水解酶測定中使用非熒光試鹵靈丁酯作為底物，其中酯鍵的酶裂解產(chǎn)生高熒光試鹵靈。后者的一個例子是涉及將 NAD(P)H 氧化為非熒光 NAD(P) ⁺的任何酶反應(yīng)。熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET) 也可用于酶測定，其中酶促反應(yīng)改變底物中兩個熒光團(tuán)的距離或方向，從而改變觀察到的供體或受體的熒光強(qiáng)度。

熒光酶測定通常比分光光度測定靈敏得多，但可能會受到雜質(zhì)造成的干擾以及許多熒光化合物在光照下的不穩(wěn)定性。在當(dāng)前階段，對通常可從人類患者獲得的組織、細(xì)胞或液體的小樣本進(jìn)行診斷酶評估的數(shù)量不斷增加，這些測定的高靈敏度特別有價值。熒光測定還特別適合反應(yīng)混合物的小型化。通過這種方式，可以進(jìn)一步大幅提高靈敏度，從而減少對酶和熒光底物樣品的需求。隨著非常昂貴或稀缺的熒光底物的出現(xiàn)，后者的保護(hù)變得重要。

憑借最新的知識和先進(jìn)的儀器，Creative Enzymes有信心為客戶提供可靠的熒光酶檢測，提供所有類型酶活性水平的量化。通過不斷追求好的服務(wù)，Creative Enzymes贏得了數(shù)以萬計客戶的信任。總體而言，Creative Enzymes致力于實(shí)現(xiàn)最高的客戶滿意度，并不斷改進(jìn)服務(wù)和質(zhì)量管理。

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