小鼠腹腔巨噬細胞是免疫系統中重要的吞噬細胞,廣泛分布于腹腔,具有吞噬病原體、清除凋亡細胞及分泌生物活性物質等功能。以下從獲取方法、細胞特性、應用場景及操作注意事項四個方面進行詳細介紹:
小鼠腹腔巨噬細胞獲取方法:
刺激物注射
巰基乙酸鹽肉湯:實驗前3天腹腔注射1mL的3%巰基乙酸鹽肉湯,可誘導無菌性炎癥,增加巨噬細胞數量。
淀粉肉湯:注射4%淀粉肉湯(含臺盼藍)可激活巨噬細胞,增強其吞噬能力。
其他刺激物:如脂多糖(LPS)也可用于激活巨噬細胞。
腹腔液收取
處死小鼠:通過脫頸或拉頸法處死小鼠,浸入75%酒精消毒。
腹腔注射與收取:向腹腔注射5mL生理鹽水或細胞培養基,輕揉腹部數次,靜置3-5分鐘使液體充分流動。隨后用注射器抽取腹腔液,注入離心管。
離心與重懸:1000r/min離心10分鐘,棄上清,加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培養基重懸細胞,進行計數與接種。
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