721可見分光光度計是一種基于物質對光的選擇性吸收進行定量分析的常規儀器,其工作原理以朗伯-比爾定律為核心理論依據。
一、理論基礎
朗伯-比爾定律的表達式為:A = KCL = -lgT。其中A為吸光度,K為吸收系數,C為溶液濃度,L為光徑長度(比色皿厚度),T為透射率(T = I/I?,I?為入射光強,I為透射光強)。在入射光波長、吸收系數和光徑不變的條件下,吸光度與溶液濃度呈線性關系,這是分光光度定量的根本依據。
二、光路與信號轉換流程
721型儀器采用自準式單光束光路,主要由光源、單色器、樣品室、光電檢測器和數字顯示系統組成。
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光源:鎢燈(進口鎢燈,壽命長)發出350~1020nm的連續輻射光,經聚光透鏡和反射鏡轉向后進入單色器。
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單色器:采用1200條/mm光柵和消色差光學系統。入射光通過進光狹縫,經準直鏡變成平行光投射到光柵上,光柵將復合光色散成按波長排列的單色光。轉動波長調節器可改變光柵角度,使所需波長的單色光從出光狹縫射出。
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樣品吸收:單色光進入寬大的樣品室,透過裝有待測溶液的比色皿(5~100mm)。溶液中待測物質選擇性吸收特定波長的光,透射光強度隨之減弱。
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檢測與顯示:透射光照射到光電管上,光信號轉換為電信號,經放大器處理后由數字顯示器直接顯示透射比(T%)或吸光度(A)。儀器具備自動調零、自動調百功能,并配有自動光門,保護光電傳感器,簡化操作。
三、測量過程
測量時,先將空白參比溶液置入光路,調節T=100%;再將待測溶液推入光路,讀取吸光度值。依據朗伯-比爾定律,即可計算出樣品濃度。
總之,721可見分光光度計通過光-電-數字轉換,實現了快速、準確的定量分析,是實驗室常用分析工具。
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