一、形態學初步鑒定

二、免疫熒光 / 免疫細胞化學鑒定（金標準）

• 陽性標志物：α?平滑肌肌動蛋白（α?SMA）、平滑肌肌球蛋白重鏈（SM?MHC），正常平滑肌細胞呈強陽性表達。
• 陰性標志物：CD31/CD34（內皮細胞標志物）、Vimentin/Fibronectin（成纖維細胞標志物），目的是排除雜細胞污染。
   
  鑒定標準：在隨機選取的 10 個以上視野中，α?SMA 陽性細胞比例≥95%，且無 CD31 陽性內皮細胞、無明顯成纖維細胞混雜，可判定為高純度平滑肌細胞。

三、流式細胞術定量鑒定

四、綜合判定與質量控制

1. 形態呈典型梭形，具有峰?谷生長特征；
2. α?SMA 陽性率≥95%；
3. 無 CD31 陽性內皮細胞及成纖維細胞污染；
4. 細胞狀態良好，無老化、分化異常。
    
   鑒定應在P2–P6 代完成，此階段細胞純度高、表型穩定。若純度不足，可通過差速貼壁法、機械刮除雜細胞等方式進一步純化，確保實驗數據真實可靠。