分類與成分：

‌傳統(tǒng)含血清凍存液‌：

配比為培養(yǎng)基:胎牛血清:DMSO=7:2:1，胎牛血清提供生長(zhǎng)因子保護(hù)細(xì)胞，DMSO作為滲透性抗凍劑抑制冰晶生成，成本較低，適合普通科研細(xì)胞系使用。

‌無(wú)血清凍存液‌：

不含動(dòng)物源成分，配方明確，從根源避免了血清帶來(lái)的外源污染風(fēng)險(xiǎn)，批次穩(wěn)定性更高，進(jìn)一步提升了使用安全性與便捷性。

細(xì)胞凍存液的使用步驟：

凍存步驟：

收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，離心，棄上清

加入預(yù)冷凍存液，調(diào)整細(xì)胞密度至 1×10? ~ 1×10? cells/mL

分裝至凍存管，標(biāo)記信息

放入程序降溫盒（或異丙醇凍存盒），置于-80℃過(guò)夜

轉(zhuǎn)移至液氮罐長(zhǎng)期保存

復(fù)蘇步驟：

從液氮/-80℃取出凍存管，立即放入37℃水浴中快速解凍（≤60秒）

解凍后立即加入10倍體積預(yù)溫培養(yǎng)基稀釋，中和DMSO

離心，棄上清，去除殘留凍存液

加入新鮮培養(yǎng)基重懸，接種至培養(yǎng)容器，鏡檢觀察