產(chǎn)品說明

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HBMEC)是血腦屏障的主要成分，主要限制可溶性和細(xì)胞性物質(zhì)從血液進(jìn)入大腦。HBMVEC利用獨(dú)特的特征，將自身與外周內(nèi)皮細(xì)胞區(qū)分開來。其中的是:1)細(xì)胞間“緊密連接"，顯示高的跨內(nèi)皮電阻和阻滯細(xì)胞旁流量[1]2)沒有穿孔和降低的液相內(nèi)吞水平[2]和3)不對稱定位的酶和載體介導(dǎo)的運(yùn)輸系統(tǒng)，產(chǎn)生真正的“極化"表型。然而，與外周內(nèi)皮細(xì)胞一樣，HBMEC在其表面表達(dá)或可被誘導(dǎo)表達(dá)細(xì)胞粘附分子，調(diào)節(jié)白細(xì)胞向大腦的外滲。HBMEC已被廣泛用于研究血腦屏障的分子和細(xì)胞基礎(chǔ)。

萬物生物提供高質(zhì)量的HBMEC，其從人腦中分離并在P1冷凍保存，每個(gè)小瓶中有≥50萬個(gè)細(xì)胞。這些六溴環(huán)十二烷通過攝取表達(dá)vWF/因子ⅷ、CD31 (PECAM)和Dil-Ac-LDL。它們對HIV-1病毒、HBV病毒、丙型肝炎病毒、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌呈陰性，并且在內(nèi)皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基中可進(jìn)一步擴(kuò)增不超過3代在萬物生物建議的條件下。進(jìn)一步膨脹可能會降低純度。

圖1。人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞。(一)HBMEC的相位對比圖像。(二)用抗CD31和vWF/因子ⅷ的抗體進(jìn)行免疫熒光染色。

產(chǎn)品詳情

我們主要的產(chǎn)品有：病理學(xué)檢測服務(wù)，細(xì)胞與蛋白，分子生物學(xué)檢測，動物實(shí)驗(yàn)造模，科研細(xì)胞及相關(guān)周邊配套產(chǎn)品與服務(wù)。

細(xì)胞產(chǎn)品：包含細(xì)胞系、原代細(xì)胞、永生化細(xì)胞（支持定制），Luc示蹤細(xì)胞、IPS細(xì)胞、耐藥株、細(xì)胞代購服務(wù)。

病理服務(wù)：包含普通病理（包埋，切片，染色）、分子病理（組化、免疫熒光、TUNEL、原味雜交）、病理圖像（切片掃描、單標(biāo)多標(biāo)、共聚焦、三維重建）、超微病理（透射電鏡、掃描電鏡、免疫電鏡服務(wù)）。

培養(yǎng)基產(chǎn)品：包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基如DMEM、DMEM/F12、1640、MEM、EMEM、F12、F12K、L15、DMEM低碳、1640低碳，無酚紅定制產(chǎn)品等基礎(chǔ)培養(yǎng)基供應(yīng)。

細(xì)胞系專用培養(yǎng)基：涵蓋我?guī)焖屑?xì)胞系對應(yīng)的專用培養(yǎng)基（含血清，因子，雙抗等），價(jià)格實(shí)惠。

原代細(xì)胞專用培養(yǎng)基包括：

DELF原代上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基（EpiCM）

DELF原代成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基（FM）

DELF原代內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基（ECM）

IPS人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代神經(jīng)元細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代少突膠質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代星形膠質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代星狀細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代角質(zhì)形成細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代間充質(zhì)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代內(nèi)皮祖細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代神經(jīng)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代周細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代雪旺細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代黑色素細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代骨骼肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代成骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代腎系膜細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代心肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代前脂肪細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代間充質(zhì)干細(xì)胞無血清專用培養(yǎng)基

DELF原代平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代平滑肌細(xì)胞低血清專用培養(yǎng)基

DELF原代腫瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代間質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代T淋巴細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代卵巢顆粒細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代肥大細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代破骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代NK細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代內(nèi)膜細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代B淋巴細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代精原細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代樹突狀（DC）細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代肝卵圓細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代腎足細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代基底細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代基質(zhì)細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代CIK細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代淋巴細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代肌腱細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代卵泡膜細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代支持細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代髓核細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代脂肪細(xì)胞專用培養(yǎng)基

DELF原代絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞專用培養(yǎng)基

請注意：

所有500ml專用培養(yǎng)基采用分裝形式發(fā)貨，其中細(xì)胞因子，雙抗，血清采用干冰發(fā)貨，基礎(chǔ)培養(yǎng)基采用冰袋發(fā)貨。收到貨后根據(jù)業(yè)務(wù)經(jīng)理提示的配置方式進(jìn)行配置，各成分按照存儲溫度分開存儲。

1）細(xì)胞凍存復(fù)蘇操作

取裝有1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管，置于 37 ℃水浴中快速振蕩至完全解凍；將細(xì)胞懸液移入裝有 4~6 mL 完全培養(yǎng)基的離心管，充分混勻。 1000 RPM 離心 3~5 min，棄除上清，加入新鮮完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。把細(xì)胞懸液接種至培養(yǎng)瓶（培養(yǎng)皿），補(bǔ)加 6~8 mL 完全培養(yǎng)基，于 37 ℃恒溫培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)過夜。次日在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)與匯合密度。

2）細(xì)胞傳代培養(yǎng)

當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80%~90% 時(shí)即可進(jìn)行傳代操作。 本細(xì)胞貼壁性能弱，屬于半貼壁 + 半懸浮混合生長型細(xì)胞，傳代操作步驟如下：

1. 細(xì)胞收集 先把培養(yǎng)瓶內(nèi)懸浮細(xì)胞全部轉(zhuǎn)移至離心管；采用無鈣鎂 PBS 洗滌貼壁細(xì)胞 1~2 次。該細(xì)胞貼壁不牢固，洗滌過程中貼壁細(xì)胞會隨 PBS 脫落，因此洗滌液同樣收集至離心管內(nèi)。

2. 胰酶消化 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 0.25%(w/v) 胰蛋白酶 - 0.53 mM EDTA 消化液（T25 培養(yǎng)瓶加 1~2 mL，T75 培養(yǎng)瓶加 2~3 mL），放入 37 ℃培養(yǎng)箱消化 1~2 min；若細(xì)胞較難消化，可適度延長消化時(shí)長。顯微鏡下觀察，待絕大多數(shù)細(xì)胞回縮變圓、開始脫壁后迅速取出培養(yǎng)瓶，輕敲瓶壁，隨即加入 3~4 mL 含 10% 胎牛血清的培養(yǎng)基終止胰酶消化。

3. 離心分瓶接種 將懸浮細(xì)胞、PBS 洗滌細(xì)胞與胰酶消化收獲的所有細(xì)胞合并，1000 rpm 離心 5 min，棄上清。加入 1~2 mL 新鮮培養(yǎng)基充分重懸，按照 1:2 的比例分裝至新 T25 培養(yǎng)瓶，每瓶補(bǔ)加 6~8 mL 新鮮配制的完全培養(yǎng)基，維持細(xì)胞活性。后續(xù)傳代可依據(jù)細(xì)胞生長速率，調(diào)整分裝比例為 1:2 ~ 1:5。

3）細(xì)胞凍存保種

建議在細(xì)胞到貨后的前 3 代完成種子細(xì)胞凍存，留存保種庫，保障后續(xù)實(shí)驗(yàn)供給。 以 T25 培養(yǎng)瓶為例，操作流程如下：

1.參照細(xì)胞傳代流程完成細(xì)胞消化與收集，使用血球計(jì)數(shù)板測定活細(xì)胞濃度。推薦凍存終密度：(1×106 至1×107) 個(gè)活細(xì)胞 /mL。

2.1000 rpm 離心 3~5 min，充分棄除上清液；用預(yù)先配制好的凍存液重懸細(xì)胞，調(diào)整濃度至目標(biāo)密度，分裝至細(xì)胞凍存管。在凍存管外壁清晰標(biāo)注細(xì)胞名稱、細(xì)胞代數(shù)、凍存日期等關(guān)鍵信息。

3.將凍存管放入程序降溫盒，置于 - 80 ℃冰箱梯度降溫過夜；次日轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期保存，同步登記凍存位置編號，方便后續(xù)調(diào)取。

懸浮細(xì)胞傳代方法

1.當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到8-10×105cell/ml 時(shí)，進(jìn)行傳代處理。

2.在生物安全柜無菌環(huán)境下打開培養(yǎng)瓶，將瓶內(nèi)全部細(xì)胞懸液移入離心管。

3.1000 rpm 離心 5 min，離心結(jié)束后棄除上清培養(yǎng)液。

4.準(zhǔn)備 2 支全新 T-25 培養(yǎng)瓶。向細(xì)胞沉淀中加入完全培養(yǎng)基充分重懸，把細(xì)胞濃度調(diào)整至 2-4×105cell/ml，均分接種至兩個(gè)培養(yǎng)瓶內(nèi)，每瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基至 6～8 mL。

5.水平平放培養(yǎng)瓶，輕輕搖勻細(xì)胞懸液，放入 37 ℃、5% CO?恒溫培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

僅用于科研，不用于臨床