在進行細胞轉染實驗的時候,真正讓研發人員感到頭疼的,并不是“能不能轉進去",而是在于如何同時達到高轉染效率、好細胞存活率和穩定實驗重復性的效果。特別是對于原代細胞、干細胞、植物原生質體等難以轉染的樣本來說,傳統的化學轉染往往會受到細胞種類以及試劑條件的影響,而病毒轉染則存在周期長、成本高、流程復雜的缺點。普通的電轉設備如果參數控制不精確的話,就有可能出現電弧、細胞損傷大、重復性不穩定等問題。
對于正在進行基因編輯、細胞治療、生物制藥、分子育種等項目的研究實驗室而言,一臺性能穩定、參數靈活的電轉儀,往往會直接對實驗推進的速度產生影響。
V-leader 威尼德 Gene Pulser 830 方波電穿孔儀,就是為這樣的高標準分子遞送實驗而設計的。主要原理就是用精確控制的方波電脈沖,在很短的時間內使細胞膜產生可逆性的通透性,從而達到促進DNA、RNA、核苷酸、蛋白質、抗體、糖類等物質的作用的目的。染料、病毒顆粒以及其他外來物質也可以進入細胞。
與只能作用于少數細胞類型的轉染方法不同的是,Gene Pulser 830 在樣本兼容性上具有明顯的優勢。不管是哺乳動物細胞、細菌、酵母、真菌,還是植物原生質體、完整植物細胞及組織,都可以根據樣本的特點來調整相應的電轉參數。因此實驗室在處理各種項目的時候,不用經常換用不同的遞送設備,一臺儀器就可以應付更多的應用場合。
對于難于轉化成染色體的細胞來說,參數控制的能力就更加重要了。Gene Pulser 830 支持電壓、脈沖持續時間、脈沖頻率和極性轉換等核心參數自定義。利用極性轉換的功能還可以使難轉染樣本的參數優化空間得到進一步拓展,從而幫助研究者根據不同細胞的狀態來尋找最合適的電穿孔條件。
許多實驗人員會擔心使用電穿孔儀時要花費很長的時間去摸索參數。Gene Pulser 830 內置了常用的哺乳動物細胞株優化程序,并提供了電壓、脈沖次數等預優化方案。對于剛剛開始構建電轉實驗體系的團隊來說,可以直接參照預設程序來進行實驗,然后根據實際情況來調整參數,從而避免了盲目試錯所導致的細胞、試劑和時間上的浪費。
從實驗安全的角度來看,該設備還配備了電弧防護裝置,可以減少高壓脈沖過程中的異常打火給樣品和儀器帶來的損害風險。另外,預脈沖樣品電阻測量功能可以使得實驗人員在正式進行電轉之前就對樣品的狀態有所了解,并且能夠及早地發現可能會對實驗造成影響的問題。
如果你們實驗室正處在“難轉染、陽性率不穩定、細胞損傷嚴重、參數反復摸索"的困境中,那么與其不斷加大試劑和樣品的投入,倒不如從分子遞送設備自身來尋求突破。
V-leader 威尼德 Gene Pulser 830 方波電穿孔儀,以精準方波輸出、靈活參數設置和廣泛細胞兼容性,為難轉染樣本提供更高效的解決方案。更加可控的電穿孔解決方案使得每次實驗優化都有據可依,使有限的珍貴樣本能夠發揮更大的作用。
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