對于想要購買細胞電轉儀的實驗室而言,最常遇到的問題就是:什么樣的細胞電轉儀轉染效率比較高呢?"
但是做過的細胞轉染實驗的人知道,這個問題沒有脫離實驗條件的標準答案。
同一樣式的細胞電轉儀,在面對不同的細胞種類、不同的目的分子、不同的細胞狀態和不同的實驗目的時,最后得到的結果會存在很大的差別。特別是原代細胞、免疫細胞、干細胞以及一些難以轉染的細胞,在比較設備頁面上某個參數的時候,往往很難判斷出該設備是否真的適合自己的實驗。
所以對于客戶而言,在決定使用細胞電轉儀之前,首先要根據自身實驗的需求來考慮。
一、首先弄清楚自己的實驗是想解決什么樣的問題?
在購買設備之前,可以先回答一些問題:
現在主要做哪些類型的細胞呢?
是普通的細胞系,還是原來的細胞、T細胞、NK細胞、干細胞等等比較難被轉化的細胞?
要引入的物質是哪一種呢?
是質粒DNA、mRNA、siRNA,或者是其他的核酸或者相關的分子呢?
實驗主要看的是什么呢?
是為了得到高陽性率,還是更加重視細胞活力、重復性和后續培養狀況,以及實驗通量?
雖然這些信息看上去很簡單,但是它直接決定了細胞電轉儀的選擇方向。
很多客戶的第一次咨詢中,都會直接詢問“設備多少錢"、“效率可以達到多少"。實際上,有效的方式是先讓技術員知道:我是哪種細胞、要轉換成什么、目前使用的是什么方法、現在遇到的問題是什么。
有了上面的信息之后,技術人員才可以進一步去判斷這個設備是不是合適,并且給到一個比較有參考意義的實驗建議。
二、為什么越來越多的實驗室開始重視細胞電轉呢?
傳統的轉染方法在常規的細胞實驗中被廣泛應用,但是當遇到一些難以轉染的細胞時,實驗人員經常會遇到效率不高、重復性差或者需要不斷優化的問題。
細胞電轉的基本原理就是用很短的時間內的電脈沖來影響細胞膜,在一定的條件下使細胞膜產生暫時性的通透性,從而幫助目標分子進入細胞。
因此,在常規轉染方式對某些細胞不起作用的情況下,細胞電轉就成為了實驗人員需要重點考慮的技術路線之一。
但是電轉并不是簡單的“用電一下",就可以得到滿意的效果。
脈沖條件、細胞的狀態、細胞的數量、緩沖體系、目的分子的量以及電轉之后的恢復培養都會對最后的實驗結果產生影響。
因此值得我們關注的并不是一臺細胞電轉儀有多少參數,而應該是:
該設備能否使實驗人員很方便地找到適合自己細胞的實驗窗口。
三、客戶選擇細胞電轉儀時,建議重點考慮以下幾點
第一,要看自己所要達到的目標細胞是否具有相應的應用基礎。
如果實驗室長期研究某種類型的細胞,在購買之前最好先向廠家詢問是否有類似的細胞類型應用的經驗。即使沒有一樣的細胞,也可以知道是否存在類似的細胞的實驗思路。
第二,看參數調節、方案制定是否便捷。
對于需要長時間進行各種細胞實驗的平臺型實驗室而言,可調能力、程序保存、實驗重復和操作便利性等,往往比單純追求所謂的“高效率"更為重要。
第三,從耗材以及長時間使用的費用來考慮。
設備采購只是一環而已。電轉杯、電轉管、電極相關的耗材和配套試劑是否容易購買,都會對以后的長期使用產生影響。
第四、考察技術支撐能力。
在進行細胞電轉的時候,售前咨詢以及售后技術支持都起著至關重要的作用。
一個好的供應商不應該只告訴客戶“設備可以做",而應該進一步了解細胞類型、實驗目的、現有實驗條件等,然后再幫助客戶縮小參數摸索范圍。
真正的有效采購的方式就是先咨詢后決定
如果你現在在找細胞電轉儀的話,那么就不要去瀏覽很多產品的頁面再一遍遍地比較參數了,倒不如先把自己做實驗的情況整理一下。
例如:
我們現在主要是做原代T細胞,希望能夠導入mRNA,比較關心的是細胞活力以及后續培養的情況。"
或者:
目前我們正在研究一種腫瘤細胞系,已經有電轉實驗的基礎了,但是轉染的結果會有一些波動,希望更換設備并且重新優化條件。"
這樣一些信息要比單獨提問一句“細胞電轉儀多少錢"更容易得到回答。
設備是否適合自己,最后還是要看具體的實驗結果。
如果正在做細胞電轉儀的選擇,請先提供一下細胞名稱、細胞來源、目的分子、實驗規模以及目前遇到的問題,讓技術人員先幫助判斷適合的電轉方案和設備配置。
一般情況下,先把實驗的需求說清楚了,然后再來談論設備型號以及價格的問題,這樣反而可以降低試錯的成本。
想知道細胞電轉儀是否適合自己的細胞嗎?歡迎大家提出實驗需求,也可以向技術員尋求有針對性的幫助。
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