高內涵篩選(High Content Screening, HCS)是生命科學與藥物研發領域的核心技術,它通過自動化顯微成像與多參數圖像分析,在單細胞水平上獲取細胞形態、結構、分子定位等多維信息,實現對生物活性物質的高效、精準篩選。橫河電機(中國)有限公司憑借其微透鏡增強型雙轉盤共聚焦技術(CSU),打造了CellVoyager系列高內涵篩選平臺。本文將從核心原理、主力機型、實驗設計三大維度,全面解析橫河高內涵篩選平臺的技術優勢與應用邏輯。

一、核心原理:雙轉盤共聚焦,平衡速度與質量
橫河CellVoyager系列的核心競爭力,源于其微透鏡增強型雙Nipkow轉盤共聚焦技術(CSU)。這是區別于傳統激光共聚焦與普通寬場成像的關鍵,解決了“高速成像”與“高分辨率、低光毒性”的行業矛盾。
1. 技術原理
系統由兩個高速旋轉的轉盤協同工作:
針孔陣列轉盤:含約20,000個精密針孔,負責對激發光進行多點光柵掃描,實現共聚焦成像的“光學切片”效果。
微透鏡陣列轉盤:與針孔盤一一對應,將激發激光高效聚焦至每個針孔,光利用率提升至70%(傳統系統僅約30%)。
2. 核心優勢
高速成像:雙轉盤高速旋轉,實現數萬點/秒的同步掃描,96孔板四色成像可在1分鐘內完成。
低光損傷:因光效高,所需激發光強度極低,顯著降低光漂白與光毒性,支持長達7天的活細胞動態追蹤。
高分辨率3D成像:出色的層切能力,可清晰解析細胞內部結構、類器官、腫瘤球等3D樣本。
二、橫河主力設備:CellVoyager系列全解析
基于核心CSU技術,橫河推出三大主力機型,覆蓋高通量篩選、精準科研、靈活常規檢測全場景需求。
1. 旗艦機型:CellVoyager CV8000(高通量篩選王)
定位:藥物研發、化合物庫大規模表型篩選。
核心配置:
光源:5色全固態激光器(405/445/488/561/640nm)。
成像:最多4臺高靈敏度sCMOS相機,同步多通道采集。
通量:兼容6~1536孔板,支持超高通量實驗。
環境:高精度內置培養箱(控溫、CO?、濕度),可選配自動加樣器。
物鏡:2x~60x全系列,含高NA水浸物鏡,深層成像信號提升4倍。
優勢:速度最快、通量最高、擴展性強,適合大型藥企與CRO的工業化篩選。
2. 經典機型:CellVoyager CQ1(桌面型精準成像)
定位:基礎科研、類器官/3D細胞模型、小規模精準驗證。
核心配置:
光源:4波長固態激光。
設計:緊湊型臺式,節省實驗室空間。
成像:高質量共聚焦圖像,支持Z軸層掃與3D重構。
應用:專注高分辨率成像,是細胞生物學、發育生物學研究的利器。
3. 新銳機型:CellVoyager CQ3000(高效全能型)
定位:2024年推出,平衡效率與靈活性,中端實驗室不錯選擇。
核心配置:
速度:支持100fps高速成像(適用于鈣信號、心肌搏動)。
智能:目標搜索功能——低倍全景掃描,自動識別目標并切換高倍采集,大幅節省時間與數據量。
培養:穩定活細胞培養環境,支持長期動態觀察。
軟件:標配CellPathfinder AI分析軟件。
三大機型對比表
| 特性 | CV8000 (旗艦) | CQ1 (經典) | CQ3000 (新銳) |
| 通量 | 很高 (1536 孔) | 中 (96/384 孔) | 高 (384 孔) |
| 相機數 | 最多 4 臺 | 1 臺 | 1-2 臺 |
| 激光器 | 5 色 | 4 色 | 4 色 |
| 體積 | 落地式 | 臺式 | 臺式 |
| 核心優勢 | 通量、擴展 | 精準共聚焦、緊湊 | 智能高速、性價比 |
| 適用場景 | 工業化大篩 | 精準科研、3D 模型 | 常規檢測、高速動態 |
三、實驗設計:基于橫河平臺的全流程指南
成功的高內涵實驗,設計是關鍵。結合橫河平臺特性,標準流程如下:
1. 模型構建與細胞準備
細胞選擇:根據研究目的選細胞系(如腫瘤細胞、干細胞)或原代細胞。橫河平臺支持貼壁、懸浮、3D類器官等多種模型。
板型選擇:
高通量篩選:384/1536孔板(CV8000)。
精細觀察:96/24孔板(CQ1/CQ3000)。
接種密度:優化至細胞單層生長、無重疊,確保單細胞分割準確。
2. 熒光標記策略(核心)
標記方案直接決定可獲取的“高內涵”信息:
核標記:Hoechst、DAPI(定位、計數、周期)。
胞漿/骨架:GFP轉染、鬼筆環肽(形態、遷移、凋亡)。
靶點蛋白:免疫熒光抗體(表達量、轉位、共定位)。
功能指標:鈣離子探針、線粒體膜電位染料(活性、信號通路)。
橫河建議:多通道組合(如核+靶點+細胞器),一次成像獲取多維數據。
3. 質控與對照設計
陰性對照:未處理細胞(基線)。
陽性對照:已知效應的藥物/試劑(驗證系統靈敏度)。
空白對照:無細胞孔(背景扣除)。
質控指標:監控Z'因子、信號背景比(S/B)、孔間變異系數(CV)。
4. 成像參數設置(橫河平臺優化)
物鏡選擇:
快速篩選:4x/10x(概覽)。
精細分析:20x/40x水浸(推薦,深層成像更佳)。
通道順序:先弱熒光、后強熒光(減少漂白)。
Z軸層掃:3D樣本(如類器官)設置0.5–1μm步長,進行三維重構。
延時拍攝:活細胞動態(如胞吞、凋亡)設置間隔時間,最長可持續7天。
5. 數據分析(CellPathfinder軟件)
橫河標配CellPathfinder智能分析軟件:
圖像預處理:去噪、背景校正、平場校正。
細胞分割:精準識別單個細胞,圈定核、漿區域。
特征提取:自動計算數十個參數(面積、熒光強度、顆粒數、共定位系數等)。
AI挖掘:內置深度學習算法,自動分類細胞表型、識別罕見事件、可視化數據聚類。
四、總結
橫河電機CellVoyager系列高內涵篩選平臺,以雙轉盤共聚焦(CSU)為技術基石,構建了從CV8000高通量工業篩選到CQ1/CQ3000精準科研的完整解決方案。其核心價值在于:高速、高分辨率、低光毒性的三位一體,配合*的AI分析軟件,讓研究者能從海量細胞圖像中深度挖掘生物學信息,極大加速了藥物研發、細胞生物學與精準醫療的進程。
無論是大型藥企的化合物庫篩選,還是實驗室的類器官機制研究,選擇適配的橫河高內涵平臺,并遵循科學的實驗設計流程,是獲得高質量、可靠數據的關鍵。
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