BHQ-3 azide 是一種高效的熒光淬滅劑，屬于 Black Hole Quencher (BHQ) 系列，其分子末端修飾有疊氮基團（-N?），賦予其良好的化學修飾能力，廣泛應用于分子生物學、化學生物學及生物醫學研究領域。

化學結構與性質

• 分子式：C??H??N??O?

• 分子量：629.79

• 外觀：深紫色至黑色固體粉末

• 溶解性：易溶于極性有機溶劑（如 DMSO、DMF），在水中的溶解性相對較差，但在某些水性緩沖液體系中可通過適當處理（如添加表面活性劑或助溶劑）達到一定程度的溶解。

• 穩定性：在干燥、避光、低溫條件下穩定，可長期儲存；溶液狀態需盡快使用以避免疊氮基團降解。

結構式：

主要應用

1. 熒光探針設計：

• 分子信標（Molecular Beacons）：BHQ-3 azide 常用于標記分子信標的 3' 或 5' 末端，與熒光報告基團（如 FAM、Cy5）形成 FRET 對。當探針處于未結合狀態時，熒光被淬滅；當探針與靶序列結合后，構象改變導致熒光恢復，實現信號的“開/關"調控。

• FRET 探針：在 TaqMan 探針、分子信標等設計中，BHQ-3 azide 作為淬滅基團，與熒光染料配對，實現靶序列擴增的實時監測。由于淬滅效率高，可有效降低背景信號，提高定量精度。

• 可控激活探針：通過設計特定的酶切位點或化學響應基團，實現熒光信號的動態調控，適用于酶活性檢測、核酸剪切等生物事件的實時監測。

2. 實時定量 PCR（qPCR）：

• BHQ-3 azide 作為探針的淬滅端，與熒光染料形成 FRET 對，實現靶序列擴增的實時監測。其高效淬滅能力顯著降低背景信號，提高檢測靈敏度和準確性。

3. 生物傳感器構建：

• 結合 BHQ-3 的熒光淬滅特性和生物分子的特異性識別能力，構建高靈敏度的生物傳感器。例如，用于檢測酶活性、核酸剪切或小分子存在等生物事件。

• 通過點擊化學反應將 BHQ-3 azide 引入傳感器體系，實現熒光信號的開關調控，適用于動態檢測與實時監控。

4. 多色熒光實驗：

• BHQ-3 的寬吸收譜與紅色熒光染料匹配，可用于多重標記實驗，實現多色信號解耦，同時減少光漂白和背景干擾。

5. 化學生物學研究：

• 通過點擊化學修飾，將 BHQ-3 azide 固定在特定生物分子上，實現定位淬滅或靶向信號調控。廣泛用于蛋白質-小分子相互作用研究、酶切活性檢測及生物成像等領域。

特點

• 高效淬滅：在 620-730 nm 波長范圍內淬滅效率接近 99%，顯著降低背景熒光，提升信噪比。

• 寬光譜吸收：覆蓋紅光至近紅外區域，適用于多種紅色熒光染料的淬滅。

• 化學修飾能力強：疊氮基團通過點擊化學實現與含炔基分子的特異性連接，操作簡便、條件溫和。

• 生物相容性好：在復雜生物環境中穩定，適用于體外實驗及活細胞成像。

• 光穩定性優良：具有抗光漂白性能，適合長時間光照環境下的應用。

儲存與操作注意事項

• 儲存條件：需在 -20℃ 以下冰凍、干燥、避光保存，避免頻繁解凍。

• 操作規范：溶液狀態需盡快使用，中性至弱堿性緩沖條件（pH 7.0-8.5）下穩定。

• 安全提示：僅供科研或工業應用，不可用于人類醫療或食用。避免反復凍融，取用后應充入惰性氣體，封口膜封口，擰緊瓶蓋裝入自封袋，并及時放入冰箱。

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