生物素標記石膽酸（Biotin-lithocholic acid）是一種將天然甾體類化合物石膽酸與生物素通過共價鍵偶聯而成的多功能分子標記工具。

一、核心合成原理

利用石膽酸的羧基與生物素的氨基，通過酰胺化反應形成穩定共價鍵，全程保留兩者的核心活性基團，該方法也被稱為?生物素-石膽酸偶聯法?。

二、經典操作步驟

1. 先將生物素用EDC/NHS活化，制備得到高活性的生物素-NHS酯中間體；

2. 將石膽酸溶解于無水二氯甲烷中，加入三乙胺調節體系至弱堿性，緩慢滴加生物素活化液；

3. 室溫避光攪拌反應8~12小時，反應結束后依次經萃取、水洗、干燥；

4. 粗產物通過硅膠柱層析純化，最終得到高純度的生物素-石膽酸產物。

三、微波輔助優化方案

可引入微波輔助合成技術，大幅提升反應效率，將反應時長縮短至1~2小時，同時顯著提升產物的純度與收率，該優化方案在同類膽酸衍生物偶聯合成中已得到驗證應用。

四、操作與儲存要點

全程需無水、避光條件下操作，產物需密封后置于-20℃環境下冷凍保存，該產物僅可用于科研實驗，嚴禁直接用于人體。

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