Cyanine3 tetrazine（Cy3-四嗪）是一種結合了Cyanine3（Cy3）熒光染料和四嗪（Tetrazine）化學基團的功能性化合物，廣泛應用于生物標記、熒光成像和分子探針設計等領域。

化學組成與性質

• 熒光染料部分（Cy3）：

• 發射波長：約570-590 nm，呈現橙紅色熒光。

• 特性：光穩定性高、熒光強度大，適合熒光顯微鏡、流式細胞術和酶聯免疫吸附測定（ELISA）等實驗。

• 應用：廣泛用于蛋白質標記、核酸探針和細胞成像。

• 四嗪基團：

• 反應性：四嗪是一種高反應性化學基團，能夠與反式環辛烯（TCO）、（甲基）環丙烯和應變的非苯并稠環炔烴發生高效的點擊化學反應（如逆電子需求Diels-Alder反應，IEDDA）。

物理性質

• 外觀：深紅色固體。

• 溶解性：

• 溶于二氯甲烷、極性有機溶劑（如DMF、DMSO）、醇類。

• 在低水含量環境中可溶，純水介質中需使用磺化版本。

• 儲存條件：-20℃下避光保存，可穩定1個年。

核心應用

1. 生物標記與成像：

• 細胞表面標記：通過四嗪與TCO修飾的細胞表面蛋白反應，實現快速、特異性熒光標記。

• 活體成像：將TCO修飾的靶向載體注入體內，待其富集后注入Cy3-四嗪，實現靶標部位的實時熒光標記。

• 蛋白質動態追蹤：利用基因工程或化學修飾將TCO基團引入目標蛋白，通過Cy3-四嗪標記追蹤蛋白質的定位和動態變化。

2. 分子探針設計：

• 與小分子或納米顆粒結合，賦予探針熒光特性。

• 通過PEG鏈的引入提高水溶性和生物相容性。

3. 藥物遞送系統：

• 標記藥物載體或靶向分子，追蹤藥物的遞送和釋放過程，監控治療效果。

4. 免疫檢測放大：

• 構建“TCO-抗體-抗原-四嗪-Cy3"夾心體系，通過快速反應實現信號放大，提升ELISA或免疫印跡的檢測靈敏度。

5. 多重熒光成像：

• 與其他波長的熒光染料（如Cy5、FITC）搭配使用，實現對多種生物分子的同時特異性標記與成像。

特點

• 高選擇性與高效性：四嗪與TCO的反應速率常數可達10?-10? M?1s?1，是目前點擊化學中反應較快的體系之一。

• 強熒光信號：Cy3染料提供強烈的橙紅色熒光信號，適合高對比度成像。

• 多功能性：結合四嗪的反應性和Cy3的熒光性質，廣泛應用于生物標記、探針設計和藥物遞送等領域。

注意事項

• 儲存與使用：需在-20℃下避光保存，避免四嗪基團氧化或Cy3光漂白。

• 反應條件：取用時需保持干燥，避免頻繁溶解和凍干；反應時間需根據目標分子動態調整。

• 光譜優化：多色成像時需優化激發/發射濾光片，減少光譜串擾。

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