BHQ-10 amine(BHQ-10氨基)是一種深色猝滅染料,屬于Black Hole Quencher(BHQ)系列的高效熒光淬滅劑,廣泛應用于生物醫學研究和分子生物學領域。
分子組成:
BHQ-10 amine的分子式為 C??H??N?Na?O?S?,分子量為578.57。其結構包含BHQ核心和氨基(-NH?)基團,氨基位于分子末端,是生物標記反應的關鍵活性位點。
物理性質:
外觀:固體或粉末狀。
溶解性:可溶于DMSO、DMF、THF等有機溶劑,在水相緩沖液(如PBS)中也有一定溶解性,適應多種實驗體系。
穩定性:耐光、耐熱,支持長期儲存和操作,但需避光、干燥保存于-20℃,避免頻繁解凍和冷凍以保持化學活性和淬滅功能。
結構式:
高效熒光淬滅:
BHQ-10的核心具有寬吸收光譜(600–750 nm,紅光至近紅外區域),可高效淬滅Cy5、Alexa Fluor 647、IRDye 680等近紅外熒光染料的激發能量。通過結合熒光共振能量轉移(FRET)和靜態猝滅效應,顯著減少信號背景,提升檢測靈敏度,實現更低噪聲、更高信噪比。
雙重淬滅機制:
結合FRET和靜態猝滅效應,避免傳統淬滅劑(如TAMRA)的背景殘留問題,確保淬滅效果更全面。
無熒光發射:
本身不發射熒光,避免干擾實驗信號,確保數據準確性。
反應活性:
氨基(-NH?)可與含羧基(-COOH)、活性酯(如NHS酯)、異氰酸酯(ITC)等基團的分子發生反應,形成穩定的酰胺鍵或硫醚鍵,實現多樣化功能修飾。反應條件溫和,支持在生理pH(如pH 7.5–8.5)下進行,保護生物大分子活性。
儲存條件:
避光、干燥保存于-20℃,避免頻繁解凍和冷凍,以保持化學活性和淬滅功能。
溶解與使用:
使用前溶解于DMF、DMSO或適當緩沖液中,現配現用,避免溶液狀態長期存放導致水解。
pH控制:
在中性或輕微堿性緩沖液(如pH 7.5–8.5)中進行反應,避免強酸或強堿環境導致氨基或活性酯基團水解。
反應時間:
根據目標分子反應活性調整反應時間(通常30分鐘至2小時),確保全偶聯。
純化步驟:
反應后通過柱層析、透析或超濾去除未反應試劑,提高產物純度。
安全操作:
僅供科研或工業應用,非藥用、非食用。操作時避免直接接觸皮膚或吸入粉塵,建議佩戴防護裝備(如手套、護目鏡)。
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