DiO（綠色細胞膜熒光探針）介紹

一、基本信息

• 名稱：DiO（DiOC18(3)），全稱為3,3′-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate。

• 外觀：橙黃至橙色固體。

• 分子式：C53H85ClN2O6。

• 分子量：881.72。

• CAS號：34215-57-1。

• 溶解性：可溶于無水乙醇、DMSO（二甲基亞砜）和DMF（N,N-二甲基甲酰胺），在DMSO中的溶解度較高，可達10mg/ml以上。溶解時若遇到困難，可適當加熱或超聲處理以促進溶解。

二、熒光特性

• 熒光顏色：綠色。

• 最大激發波長：484nm。

• 最大發射波長：501nm。

• 熒光強度：DiO在進入細胞膜之前熒光非常弱，僅當與細胞膜結合后，其熒光強度才會大大增強。

• 檢測濾光片：可用標準的FITC（異硫氰酸熒光素）濾光片進行檢測。

• 淬滅特性：具有很高的淬滅常數和激發態壽命，熒光信號穩定。

三、應用特性

• 親脂性：DiO是一種親脂性膜染料，能夠特異性地嵌入細胞膜中。

• 側向擴散：進入細胞膜后，DiO可以側向擴散，逐漸使整個細胞的細胞膜被染色。

• 生物相容性：DiO通常不會明顯影響細胞的生存力，因此被廣泛用于正向或逆向的、活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑。

• 多功能性：除了簡單的細胞膜熒光標記外，DiO還可用于檢測細胞的融合和粘附、發育或移植過程中的細胞遷移、通過FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching，光脫色熒光恢復技術）檢測脂在細胞膜上的擴散、檢測細胞毒性以及標記脂蛋白等。

四、注意事項

• 避光保存：熒光染料均存在淬滅問題，DiO應盡量避光保存，以減緩熒光淬滅。

• 固定液選擇：使用4%多聚甲醛（配制在PBS中）進行細胞固定，避免使用其他不適當的固定液，以免導致熒光背景較高。

• 操作規范：在進行細胞染色等操作時，應穿實驗服并戴一次性手套，以確保安全和健康。

• 科研用途：DiO僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療、食品或藥品等領域。

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