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一、基本信息
產(chǎn)品中文名稱:CY5標記鏈霉親和素
產(chǎn)品英文名稱:Cy5-Streptavidin Conjugate
分子量:約65-68 kDa(四聚體,視標記度而定)
純度:≥95%
外觀:橙紅色至暗紅色固體粉末或深紅色透明液體
標記度:每個四聚體平均3-5個CY5分子
激發(fā)/發(fā)射波長:646 nm / 662 nm
消光系數(shù):約250,000 cm?1M?1
濃度規(guī)格:常見1 mg/mL水溶液(含0.1% BSA),固體有1 mg、5 mg、10 mg等規(guī)格
溶劑:PBS或超純水(pH 7.2-7.4),含0.1% BSA或0.02%-0.1% Tween 20
二、結(jié)構(gòu)與特性
鏈霉親和素為四聚體蛋白,分子量約65 kDa,等電點約pH 6.0,每個四聚體含4個生物素結(jié)合位點,與生物素解離常數(shù)Kd≈10?1? mol/L,結(jié)合較強且特異。
CY5屬花菁染料,激發(fā)位于紅光區(qū),發(fā)射位于近紅外區(qū),可有效避開生物樣本自發(fā)熒光干擾,亮度高、光穩(wěn)定性好。
偶聯(lián)方式為CY5-NHS酯與鏈霉親和素表面賴氨酸ε-氨基的酰胺化反應(yīng),pH 8.3-8.5,4°C反應(yīng)1-4小時。復(fù)合物耐高溫(80°C以下)、耐SDS、耐ji端pH(pH 2-12)。
三、包裝與保存
固體:密封鋁箔袋或玻璃安瓿,-20°C以下避光干燥保存,有效期12月
從冰箱取出后緩慢恢復(fù)至室溫,切勿加熱,使用前輕柔顛倒混勻
四、主要應(yīng)用
免疫熒光成像、流式細胞術(shù)、Western Blot、FISH原位雜交、ELISA、活細胞成像、空間組學(xué)多重染色、納米顆粒功能化、微流控芯片分子捕獲等
五、使用方法
工作濃度:免疫熒光1-10 μg/mL,流式0.1-1 μg/mL/10?細胞,WB 0.5-2 μg/mL
典型免疫熒光流程:細胞固定→通透→3% BSA封閉→生物素化一抗4°C過夜→PBS洗滌3次→CY5-鏈霉親和素室溫避光30-60分鐘→PBS洗滌3-5次→封片觀察
注意:全程避光操作,不可用含NaN?緩沖液,多色實驗需驗證光譜重疊
六、安全警示
僅供科研使用,嚴禁臨床或人體應(yīng)用。操作時戴手套、護目鏡,通風(fēng)櫥內(nèi)稱量粉末。廢液收集專用廢液桶處理,不可直接排入下水道。不可與游離生物素共存保存,pH維持6.5-8.0。
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溫馨提示:供應(yīng)產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體!
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