基本信息

中文名：FITC-膽汁酸，又名熒光素標記膽汁酸、異硫氰酸熒光素標記膽酸、綠色熒光膽汁酸探針。

英文名：FITC-Cholic acid / FITC-Bile acid。

外觀為黃色至綠色熒光凍干粉。

純度通常≥95%。

保存條件為-20°C避光密封保存，避免反復凍融。

易溶于PBS緩沖液、DMSO、DMF等，在水中也有良好溶解性。

結構與熒光特性

FITC-膽汁酸由熒光素異硫氰酸酯（FITC）與膽汁酸（如膽酸、脫氧膽酸、鵝去氧膽酸、牛磺膽酸等）通過共價鍵（硫脲鍵或酯鍵）結合而成。FITC部分賦予綠色熒光特性，膽汁酸部分保留其生物活性。激發波長約490–495 nm，發射波長約519–520 nm，量子產率高，適合熒光顯微鏡、流式細胞術及活體成像等檢測平臺。

核心用途

膽汁酸代謝與轉運研究是最核心的應用。FITC-膽汁酸保留了天然膽汁酸與轉運蛋白（如NTCP、BSEP、ASBT）的結合能力，可用于可視化膽汁酸在肝細胞中的攝取、在腸道中的重吸收以及整個腸肝循環過程。例如FITC-牛磺膽酸主要通過NTCP進入肝細胞，加入抑制劑后攝取率顯著下降，可直觀驗證轉運機制。

肝膽疾病模型成像方面，在NAFLD大鼠模型中，尾靜脈注射FITC-脫氧膽酸后，利用多光子顯微鏡可動態監測肝臟熒光分布。模型組肝細胞內熒光強度較正常組降低約45%，提示膽汁酸外排障礙是NAFLD進展的重要機制。聯合FXR激動劑治療后熒光可從胞質向膽管重新分布，與血清ALT改善呈正相關。

藥物遞送與靶向研究方面，將FITC-膽汁酸與納米載體或脂質體結合，利用FITC信號實時監控藥物的遞送路徑與釋放效率，可開發靶向肝臟的藥物輸送平臺。

受體與信號通路研究方面，膽汁酸可激活FXR（法尼醇X受體）和TGR5（G蛋白偶聯膽汁酸受體），FITC標記后可用于研究這些信號通路的時空動態。FITC-GCDCA已成功用于篩選FXR受體激動劑，IC50值小于100 nM。

流式細胞術與熒光顯微鏡檢測方面，激發波長490 nm、發射520 nm的綠色熒光使其適配常見流式細胞儀和共聚焦顯微鏡的濾光片組，可進行細胞攝取定量分析和亞細胞定位。

藥物相互作用與競爭性抑制實驗方面，FITC-膽汁酸可作為熒光底物，評估其他藥物或化合物對膽汁酸轉運蛋白的抑制效應，預測藥物的肝膽排泄效率與潛在藥物相互作用。

合成方法

通常以膽汁酸上的羧基或氨基為活性位點，通過EDC/NHS活化生成活性酯中間體，在堿性緩沖液中（pH 8.0–9.0）與FITC的異硫氰酸基反應，形成穩定的共價鍵連接。產物經HPLC純化，利用質譜（MS）、核磁共振（NMR）和熒光光譜鑒定。

使用注意事項

避光操作，防止FITC熒光淬滅。溶解時建議使用無菌PBS緩沖液或含適量DMSO的溶劑。實驗中合理控制濃度，避免高濃度產生細胞毒性或非特異性結合。儲存時需密封避光于-20°C，避免反復凍融。FITC標記可能輕微改變膽汁酸的理化性質，需通過競爭實驗驗證其功能性。

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