細胞劃痕實驗看似簡單，但標準化的操作是獲得可重復結果的基礎。本文為您詳細拆解從細胞鋪板到定時拍照的每一步，助您建立規范的實驗流程。

一、實驗前準備

材料：6孔板或24孔板、無菌P200/P1000槍頭、無血清培養基、PBS、顯微鏡、記號筆。

細胞：處于對數生長期、狀態良好的細胞。

二、詳細操作步驟

步驟1：細胞鋪板

在培養板中接種適量細胞，確保密度均勻。

培養至細胞融合度達到90%-100%，形成致密單層（通常需過夜培養）。

步驟2：制造劃痕

使用無菌槍頭（推薦P200），垂直于板底勻速劃線。

技巧：用無菌直尺或板蓋作導向，確保劃痕筆直、寬度一致。

每孔可劃1-2條直線，避免多條交叉劃痕。

步驟3：清洗細胞

吸棄培養基，沿孔壁緩慢加入PBS或無血清培養基。

輕輕晃動后吸棄，重復2-3次，去除刮下的懸浮細胞。

步驟4：加入實驗培養基

更換為無血清或低血清（≤2%）培養基，以排除增殖干擾。

若需藥物處理，此時加入含藥培養基。

步驟5：0小時拍照

立即在顯微鏡下找到劃痕區域，調整焦距至最清晰。

拍攝第-張照片，記錄初始劃痕寬度和位置（建議同時記錄坐標或做標記）。

步驟6：培養與定時拍照

將培養板放回培養箱繼續培養。

在預設時間點（如6h、12h、24h等）取出，于同一位置拍照。

注意：每次拍照前檢查細胞狀態，避免污染。

三、關鍵注意事項

細胞密度：密度過低會導致劃痕邊緣細胞稀疏，影響遷移；密度過高則可能導致細胞多層，阻礙遷移。

清洗力度：必須輕柔，避免沖走貼壁細胞。

拍照一致性：確保每次拍照的放大倍數、曝光條件一致，便于后續定量分析。

總結：嚴格按照標準化流程操作，能大程度減少實驗誤差，為后續數據分析打下堅實基礎。

柏萊源（天津）生物科技有限公司的優勢:

現貨供應：公司庫存充足，可快速發貨，減少用戶等待時間。

效期保障：嚴格把控產品質量，確保試劑效期新鮮，保障實驗結果的可靠性。

專業技術支持：提供詳細的實驗方案和技術指導，幫助用戶優化實驗條件，提高實驗成功率。

定制化服務：根據用戶需求，提供個性化的產品和服務解決方案。

售后保障：*的售后服務體系，及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。