
細胞莫名爆發支原體污染,優先從 5 個渠道溯源,實驗室 99% 支原體污染均出自以下場景,本文逐條拆解污染源細節。
引入外源細胞是高發污染源:引進未檢測的外購細胞、保藏細胞,細胞自帶支原體,共用培養瓶、移液器、廢液盤時,支原體快速擴散至實驗室原有細胞株,是最常見的跨細胞污染誘因。
實驗人員口腔、皮膚是口腔支原體、人型支原體天然宿主,感冒咳嗽、未規范佩戴口罩手套操作時,飛沫、手部皮屑掉落培養體系,直接造成細胞污染,也是日常隱性污染主要來源。
支原體可在超凈臺臺面、移液器槍頭盒、細胞計數板、廢液盤長期存活,污染細胞后的操作臺,放置新培養瓶極易二次污染;超凈臺雜物堆放過多,氣流紊亂、過濾效率下降,提升環境染菌概率。
l 胎牛 / 新生牛血清攜帶精氨酸支原體、萊氏無膽甾支原體(牛源);
l 豬源胰酶原材料易混入豬鼻支原體; 未做原料抽檢直接配制培養液,會造成整批次培養基帶菌。
高壓滅菌失誤:滅菌鍋內耗材堆積過密、受熱不均,部分培養瓶、離心管滅菌不徹-底;滅菌程序時間設置太短,耗材殘留活支原體,投入使用后污染細胞。
支原體污染防控優先管控:新細胞、新試劑入庫抽檢 + 人員規范無菌操作 + 定期環境消殺,從源頭切斷五大污染路徑。
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