凝膠滲透色譜的核心原理是基于分子尺寸大小的分離機制。它使用具有多孔結構的凝膠作為固定相，當樣品溶液通過色譜柱時，不同分子量的高分子化合物會因體積差異而表現出不同的滲透能力。較大的分子無法進入凝膠顆粒的小孔，只能沿著顆粒間的間隙流動，因此路徑較短、流速較快；而較小的分子可以滲入更多毛孔內部，導致其流動路徑更長、速度更慢。這種差異使得大分子先被洗脫出來，小分子后出峰，從而實現按分子量從大到小的順序依次分離。
 

　　分配與流動過程：樣品溶解于適當溶劑后注入色譜柱，在流動相(通常為有機溶劑)推動下穿過填料。由于不同大小的分子在多孔介質中的擴散深度和滯留時間不同，形成與分子體積相關的保留時間分布。這一特性特別適用于分析聚合物、蛋白質等大分子物質的分子量分布及結構特征。
 

　　校正與定量分析：通過已知標準品建立校準曲線，可將保留時間轉換為對應的分子量數值，進而準確測定樣品中各組分的含量比例。該技術還支持普適校正方法，提高了跨實驗室數據的可比性。
 

　　凝膠滲透色譜(GPC)的測定步驟：
 

　　1.前期準備與樣品溶解
 

　　-選擇合適溶劑：根據樣品性質選取能溶解它的流動相，如THF、DMSO或水相等；
 

　　-配制溶液：將適量樣品溶于所選溶劑中，確保均勻無顆粒物殘留，必要時進行過濾處理以避免堵塞色譜柱。
 

　　2.儀器開機預熱：啟動設備后等待系統穩定，包括泵、檢測器等組件達到工作狀態。
 

　　3.基線校準：注入空白溶劑作為參比，建立穩定的基線信號，用于后續數據分析時的扣除背景干擾。
 

　　4.進樣分析：通過自動進樣器或手動方式將處理好的樣品注入色譜柱頂端，記錄時間并開始數據采集。
 

　　5.數據采集與處理：利用軟件實時監控流出曲線，計算重均分子量(Mw)、數均分子量(Mn)、Z均分子量(M)及分散系數(PDI)，生成分子量分布圖。
 

　　6.清洗維護：實驗結束后用高純度溶劑沖洗管路和柱子，防止殘留物影響下次實驗結果。