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做液相的小伙伴都知道,液相色譜柱是整個分離系統(tǒng)的“心臟"。正確操作液相色譜柱對于液相色譜分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性有著關(guān)鍵作用!以下是山東鑫之恒儀器分享液相色譜柱使用操作注意事項:
1、柱子在裝卸、更換時,動作要輕。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動,以免柱床產(chǎn)生空隙。
2、建議分析配置專用柱,這樣有助于延長柱的壽命。
3、避免壓力和溫度的急劇變化。壓力和溫度的突然變化會影響柱內(nèi)的填充狀況,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
4、一般來說色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時,才可以反沖出去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
5、選擇使用適宜的流動相,避免固定相被破壞。有時可以在進(jìn)樣器前連接一個預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時,預(yù)柱為硅膠,可使流動相在進(jìn)入分析柱之前備硅膠“飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
6、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品,尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱間連接一個保護(hù)柱。保護(hù)柱一般填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
7、經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過度,每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,及常規(guī)分析需要50-75mL。
8、保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。
9、在完成分離分析工作之后,不應(yīng)立即停機(jī),需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗,一般0.5h以上,以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
10、應(yīng)建立色譜柱檔案,主要內(nèi)容可以包括:品牌、型號、自制編號、使用記錄(使用人、使用日期、更換日期)等,監(jiān)控以及掌握色譜柱使用情況。
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