序：

北 京 基 爾 比 生物科技公司主營產品：

Kilby 多通道旋轉細胞培養系統（RCCS），

Kilby Gravity 微超重力三維細胞培養系統，

動植物/微生物等地面重力環境模擬裝置【可以定制】，

Kilby Bio類器官擺動式精密灌注搖床，

Kirkstall Quasi Vivo 類器官3D串聯芯片灌注培養系統

一、NAFLD/NASH 的流行病學與發病機制

流行病學：NAFLD 是常見的慢性肝病，影響約25%的普通人群，在肥胖、糖尿病和病態肥胖人群中患病率分別高達57%、70%和90%。

發病機制：

• “二次打擊"假說：shou ci打擊為肝內甘油三酯積累；第二次打擊涉及脂毒性、炎癥和纖維化。

• 腸-肝軸失調：腸道屏障功能受損、微生物組改變、細菌移位等參與NAFLD向NASH的進展。

二、腸-胰-肝軸與激素調節

1. 腸促胰島素激素

GLP-1 和 GIP 是主要由腸道L細胞和K細胞分泌的激素，響應進食。

作用：增強葡萄糖刺激的胰島素分泌；GLP-1抑制胃排空、抑制食欲、減輕體重；GIP在T2D患者中失去促胰島素作用。

2. GLP-1受體激動劑 在NAFLD/NASH中的作用

代表藥物：利拉魯肽、司美格魯肽、杜拉魯肽、艾塞那肽等。

療效：改善肝酶（ALT）、減少肝脂肪含量；減輕肝臟炎癥和纖維化（如LEAN試驗顯示利拉魯肽使39%的NASH患者病情緩解）；通過AMPK、SREBP1c等通路調節肝脂代謝。

3. DPP-4抑制劑

如西格列汀，通過抑制GLP-1降解提高其水平；對NAFLD/NASH的益處有限，可能與體重減輕不明顯有關。

三、GLP-1聯合激動劑

1. GLP-1/胰高血糖素雙激動劑

如Cotadutide、ZP2929，在動物模型中顯示更強減重、降糖、改善肝脂肪和纖維化作用。

2. GLP-1/GIP雙激動劑

如Tirzepatide，在臨床試驗中顯著改善血糖、體重、肝酶和NASH生物標志物。

3. GLP-1/GIP/胰高血糖素三激動劑

如HM15211，在臨床前研究中顯示出優于單激動或雙激動劑的代謝改善效果。

四、腸道微生物組與腸-肝軸

1. 腸道菌群失調，NAFLD/NASH患者腸道中：

有益菌（如擬桿菌、阿克曼菌）減少；致病菌（如變形菌、大腸桿菌）增加；菌群多樣性降低與肝病嚴重程度相關。

2. 菌群代謝產物

短鏈脂肪酸：如丁酸、丙酸，可影響GLP-1分泌、調節免疫和腸道屏障；次級膽汁酸：如DCA、LCA，與肝損傷和HCC風險增加相關；內毒素：如LPS，通過TLR4激活Kupffer細胞，促進炎癥和纖維化。

五、膽汁酸信號與FXR激動劑

1. FXR激動劑

奧貝膽酸：在FLINT和REGENERATE試驗中顯示可改善肝纖維化，但存在瘙癢、血脂升高等副作用；

非膽汁酸類FXR激動劑：如Tropifexor、Cilofexor，正在臨床試驗中。

2. FGF19/21類似物

NGM282：在臨床試驗中顯著改善肝脂肪、炎癥和纖維化，且無致癌性。

六、腸道屏障功能與細菌移位

1. 腸道通透性增加

• 標志物：血漿連蛋白升高、乳果糖/甘露醇比值增加；

• 誘因：高脂飲食、高血糖、菌群失調、炎癥小體缺失等。

2. 細菌移位

細菌及其產物（如LPS）通過門靜脈進入肝臟，激活TLR4/9、NF-κB通路，促進炎癥和纖維化。

北京基爾比生物Kirkstall Quasi-Vivo多細胞/器官串聯動態灌注培養系統

七、基于北京基爾比生物Kirkstall Quasi-Vivo多細胞/器官串聯動態灌注培養系統構建“腸-胰-肝"軸模型：推動NAFLD/NASH研究

7.1 Quasi-Vivo系統的核心優勢與模型構建

Quasi-Vivo系統的精髓在于其生理相關的流路設計和模塊化器官腔室。在NAFLD/NASH研究中，我們可以構建一個包含“腸道-胰腺-肝臟"的串聯模型：

1. 腸道模塊： 利用Caco-2細胞模型或患者來源的腸類器官，在流體剪切力下形成更成熟的刷狀緣和緊密連接，模擬真實的腸道屏障。

2. 胰腺模塊： 共培養胰島β細胞與α細胞，用于實時監測在腸道信號刺激下胰島素、胰高血糖素等激素的分泌動態。

3. 肝臟模塊： 使用HepG2、Huh7等肝細胞系或肝類器官，甚至與肝星狀細胞共培養以模擬纖維化，作為代謝與損傷的終末響應器官。

Kirkstall三個模塊通過生理性流路串聯，培養基（如同“血液"）依次流過腸道、胰腺和肝臟，實現了激素、代謝物和炎癥因子在器官間的定向傳遞與調控，精準模擬了體內的腸-胰-肝軸。探究利拉魯肽在“腸-胰-肝"動態共培養模型中對高棕櫚酸誘導的NASH表型的改善作用及機制。

7.2. 實驗目的

Quasi-Vivo系統模擬高脂環境下的腸-胰-肝軸功能障礙。闡明利拉魯肽通過該多器官系統發揮肝保護作用的直接與間接機制。解析利拉魯肽對腸道屏障、腸促胰島素分泌及肝內信號通路的協同調控。

7.3. 實驗模型構建

系統配置： 采用Kirkstall Quasi-Vivo系統，按“腸道 → 胰腺 → 肝臟"順序串聯三個培養模塊。

北京基爾比生物Kirkstall Quasi-Vivo 細胞模型：

腸道模塊： 在可滲透膜上培養Caco-2細胞，誘導分化為具有緊密連接的腸上皮屏障。在基底側共培養人原代腸道類器官來源的L細胞（或使用表達GCG報告基因的細胞系），以監測GLP-1分泌。

胰腺模塊： 共培養人源胰島細胞團（或β細胞系INS-1與α細胞系αTC1-6的混合培養物）。

肝臟模塊： 培養HepG2肝細胞球狀體，并與人肝星狀細胞LX-2共培養，以模擬肝實質細胞活化與纖維化潛能。

循環培養基： 使用含10% FBS的DMEM/F12培養基，以0.15 mL/min的流速持續循環，模擬生理性門靜脈血流。

7.4. 實驗分組與處理

對照組： 正常培養基循環培養72小時。

NASH模型組： 在培養基中加入400 μM棕櫚酸，循環培養72小時，以誘導肝細胞脂肪變性、胰島素抵抗及輕度炎癥。

利拉魯肽治療組： 在加入400 μM棕櫚酸的同時，在腸道模塊的入口處持續輸注100 nM利拉魯肽，循環培養72小時。

*(關鍵點：將藥物僅從腸道端加入，可以模擬其臨床給藥途徑，并觀察其隨體液循環對下游器官的遠端效應)

7.5. 檢測指標與方法（略）

Kirkstall Quasi Vivo®類器官串聯3D動態灌流培養系統