一、BCOP試驗為什么受到關注？

2025年8月，國家藥品監督管理局發布2025年第32號通告，將《牛角膜渾濁度和滲透性試驗方法》等5項方法納入《化妝品安全技術規范（2015年版）》，并于2026年3月1日起正式實施。

BCOP試驗采用屠宰場來源的離體牛角膜作為試驗系統，通過檢測受試物造成的角膜渾濁度變化和滲透性變化，評價其潛在眼刺激或嚴重眼損傷風險。

需要注意的是，新方法納入規范并不等于所有化妝品企業都必須購買牛角膜濁度儀。對于計劃在實驗室內部開展BCOP試驗的檢驗檢測機構、化妝品企業、CRO或科研單位，牛角膜濁度測量設備屬于試驗系統中的關鍵儀器之一。

二、BCOP試驗的基本原理

角膜受到刺激性物質作用后，通?？赡艹霈F兩類變化：

1. 角膜透明度下降，表現為渾濁度升高；

2. 角膜屏障功能受損，導致熒光素鈉滲透量增加。

BCOP試驗分別測量這兩項指標，并根據規定的評價模型計算刺激性評分。

1. 角膜渾濁度測量

牛角膜濁度儀通過光學系統測量光線穿過角膜前后的變化，得到角膜渾濁度數據。

角膜越透明，透過角膜的光線越穩定；角膜損傷越明顯，光散射或光衰減通常越顯著。因此，光源穩定性、光路一致性、檢測重復性以及角膜夾持器的安裝狀態，都會影響渾濁度測量結果。

2. 角膜滲透性測量

完成受試物暴露和渾濁度測量后，通常使用熒光素鈉評價角膜滲透性。

熒光素鈉穿過受損角膜進入后腔，再通過酶標儀或分光光度計測量相應吸光度。常用檢測波長為490 nm，因此試驗資料中經常出現OD490這一參數。

需要說明的是，牛角膜濁度儀主要負責角膜渾濁度檢測；完整開展BCOP試驗通常還需要OD490檢測設備、角膜夾持器、恒溫設備以及相關試劑耗材。

三、BCOP試驗的一般操作流程

不同標準、受試物類型和實驗室SOP可能存在差異，一般試驗流程包括以下環節：

1. 牛眼獲取和檢查

牛眼通常來源于正規屠宰場。獲取后應按照規定條件運輸，并對角膜進行初步檢查，排除存在損傷、明顯渾濁或其他異常的角膜。

2. 角膜分離與安裝

將符合要求的角膜從牛眼中分離，保留適當鞏膜環，并安裝到角膜夾持器中。安裝過程中需要避免折疊、拉伸、氣泡和機械損傷。

3. 平衡與基線測量

安裝后的角膜在規定溫度和培養條件下進行平衡，隨后測量初始渾濁度。

基線數據異常的角膜應按照試驗方法和實驗室SOP進行判斷，不宜直接進入后續試驗。

4. 受試物暴露

將受試物加入角膜上皮側。液體、固體、乳霜、表面活性劑等不同類型樣品，其給樣方式、暴露時間和沖洗方式可能不同，應根據適用方法確定。

5. 沖洗與后處理

暴露結束后對角膜進行沖洗，并按照規定條件進行后續孵育。沖洗是否充分、受試物是否殘留，是影響試驗重復性的常見因素。

6. 暴露后渾濁度測量

再次使用牛角膜濁度儀測量角膜渾濁度，并結合基線值、陰性對照和陽性對照進行數據處理。

7. 滲透性檢測

向角膜上皮側加入熒光素鈉。孵育完成后，從角膜內皮側收集介質，并測量OD490等滲透性指標。

8. 結果計算與判定

根據試驗采用的儀器類型和評價路徑，計算IVIS或LIS，并按照相應方法規定進行結果解釋。

四、IVIS模型與LIS模型有什么區別？

IVIS和LIS都是用于BCOP試驗結果評價的模型，但兩者對應的渾濁度測量原理、數據計算方式及判定條件不同，不能簡單理解為同一臺設備中的兩個軟件選項。

IVIS模型

IVIS是體外刺激性評分，其基本計算形式為：

IVIS＝平均渾濁度＋15×平均OD490

根據2025版OECD TG 437：

• IVIS≤3：可判定為不需要進行眼刺激或嚴重眼損傷分類；

• IVIS≥55.1：可判定為GHS嚴重眼損傷類別1；

• 3＜IVIS＜55.1：通常不能僅依靠該結果完成分類，需要結合其他試驗方法或證據進行綜合評價。

LIS模型

LIS模型采用相應的光學數據評價角膜損傷。根據2025版OECD TG 437：

• LIS≤30：可判定為不需要進行眼刺激或嚴重眼損傷分類；

• LIS＞30且同時滿足規定的滲透性或光學條件時，可判定為GHS嚴重眼損傷類別1；

• 其余結果一般屬于不能單獨完成分類的范圍。

實驗室應依據實際采用的法規、標準版本及內部SOP進行判定，不能把IVIS閾值直接套用于LIS數據，也不能把LIS閾值用于IVIS數據。

五、為什么很多客戶會咨詢OP3.0？

OP3.0是較早進入BCOP實驗室的進口牛角膜濁度測量設備之一，因此，一些已經建立BCOP方法的實驗室積累了OP3.0歷史數據。

這類實驗室在更新設備時，通常重點關注以下問題：

• 新設備是否采用IVIS評價模型；

• 渾濁度數據與原設備的趨勢是否一致；

• 陽性對照和陰性對照能否滿足接受標準；

• 是否可以進行方法轉移或設備比對；

• 原始數據、計算結果和檢測報告能否追溯；

• 角膜夾持器能否滿足現有試驗通量；

• 是否提供安裝培訓和后續技術服務。

需要特別注意，設備之間的數據相關性不能代替實驗室內部的方法確認。更換設備后，建議根據質量體系要求開展適用性評價、對照品試驗和人員能力確認。

六、牛角膜濁度儀選型需要關注哪些指標？

1. 先確定IVIS還是LIS

實驗室應先明確準備采用的評價路徑，再選擇儀器配置。對于已有OP3.0方法和歷史IVIS數據的實驗室，通常更關注IVIS體系的延續性；計劃建立LIS方法的實驗室，則應選擇對應的LIS配置。

2. 光源和光路穩定性

光源漂移、雜散光和角膜位置變化都可能影響測量結果。建議關注儀器光源類型、預熱要求、重復測量穩定性以及日常檢查方式。

3. 角膜夾持器的一致性

角膜夾持器既承擔角膜固定作用，也構成前后腔體。密封性、裝配一致性和透光位置會直接影響試驗結果。

當前上海梅理 OPMaster牛角膜濁度儀配置方案中，角膜夾持器數量為10只，具體配置應以供貨合同和技術清單為準。

4. 數據處理與追溯

建議關注軟件能否完成樣品信息記錄、渾濁度數據采集、結果計算、對照組管理、報告輸出及歷史數據查詢。對于有質量體系或數據完整性要求的實驗室，還應提前確認用戶權限、審計追蹤及數據備份需求。

5. 是否包含完整試驗配套

一套完整的BCOP試驗系統通?？赡苌婕埃?/p>

• 牛角膜濁度儀；

• 角膜夾持器；

• 恒溫培養設備；

• OD490檢測設備；

• 熒光素鈉及培養介質；

• 牛眼運輸和處理工具；

• 陽性對照、陰性對照及其他試驗耗材。

采購前應確認報價范圍，避免把“牛角膜濁度儀"誤認為完整BCOP實驗室的全部設備。

七、OPMaster牛角膜濁度儀的配置方式

 OPMaster牛角膜濁度儀目前分為兩種配置：

• 標準版：IVIS模型，適合采用傳統IVIS評價體系，以及關注OP3.0歷史方法銜接的實驗室；

• 高配版：LIS模型，適合計劃采用LIS評價路徑的實驗室。

IVIS版和LIS版需要在采購時確定，并不是設備到場后通過軟件自由切換。實驗室在選型前，應根據適用標準、現有SOP、歷史數據及未來檢測項目進行綜合判斷。

設備采用穩定光源和專用角膜夾持結構，通過配套軟件完成渾濁度檢測及數據管理，可應用于化妝品、化學品、日化產品及相關科研領域的體外眼刺激評價。

八、結語

BCOP試驗并不是單純進行一次渾濁度測量，而是一套涵蓋牛眼獲取、角膜篩選、夾持安裝、受試物暴露、渾濁度檢測、滲透性檢測和結果判定的完整試驗體系。

對于準備建設BCOP實驗室的單位，建議先確定適用法規和評價模型，再配置牛角膜濁度儀及相關配套設備；對于已有OP3.0等設備的實驗室，則應重點考慮歷史數據銜接、方法確認和質量體系要求。

曦源科學儀器（上海）有限公司可為用戶提供 OPMaster牛角膜濁度儀的IVIS/LIS選型溝通、配置建議、安裝培訓及相關技術支持。