一、操作前準備
環境檢查:確認工作臺平穩、防震、防塵、防潮;電源電壓為220V±10%。
設備檢查:檢查目鏡、物鏡、載物臺、光源及調焦旋鈕是否完好,鏡頭無灰塵、無油污。
試樣準備:試樣需經磨制、拋光、浸蝕,觀察面清潔、干燥、無殘留浸蝕劑;倒置顯微鏡觀察面朝下,正置顯微鏡觀察面朝上。
二、開機與光源調整
連接電源:將顯微鏡光源插頭接入低壓變壓器(6~8V),再將變壓器接入220V電源;嚴禁直接插220V。
打開光源:開啟電源開關,調節亮度旋鈕至適中(低倍50%亮度、高倍≤20%),避免過亮或忽明忽暗。
光路校準(柯勒照明):
縮小視場光闌,調焦至試樣清晰。
調節聚光鏡高度,使光闌邊緣清晰聚焦。
開大視場光闌至充滿視場,調整孔徑光闌至物鏡NA值的70%,平衡分辨率與景深。
三、安裝目鏡與物鏡
安裝目鏡:選擇合適目鏡(如10×),插入目鏡筒并固定。
選擇物鏡:從低倍(如5×、10×)開始,轉動轉換器將物鏡對準光路,動作輕緩。
四、放置試樣
將試樣觀察面朝下(倒置)/朝上(正置),置于載物臺中心,用壓片固定。
調整載物臺X/Y軸,使試樣觀察區域對準物鏡中心。
五、調焦操作(核心步驟)
粗調焦(低倍):
轉動粗調旋鈕,下降載物臺使物鏡與試樣間距約2~3mm(不接觸)。
目鏡觀察,緩慢上升載物臺,直至視野出現模糊組織。
微調焦:轉動微調旋鈕,至圖像最清晰;切換高倍物鏡(40×、100×)時,僅用微調,防止鏡頭碰撞。
高倍/油鏡(100×):
40×清晰后,轉100×物鏡,微調至清晰。
油鏡需在試樣表面滴香柏油,使物鏡鏡頭浸入油中,微調對焦;使用后立即用鏡頭紙擦凈油跡。
六、觀察與調整
移動載物臺:調節X/Y軸旋鈕,觀察試樣不同區域,找代表性組織。
優化成像:調整孔徑光闌、視場光闌及濾光片,提升對比度與清晰度。
圖像采集(選配):連接相機,設置曝光、白平衡,拍攝并保存圖像。
七、關機與整理
復位設備:將載物臺降至低,物鏡轉至低倍位,亮度調至最小。
關閉電源:先關光源開關,再拔電源插頭;油鏡需清潔鏡頭。
清潔保養:用鏡頭紙擦拭目鏡、物鏡;試樣取下,臺面清潔;蓋上防塵罩,冷卻后再蓋。
記錄:填寫使用記錄本,注明使用時間、設備狀態及異常情況。
八、關鍵注意事項
防碰撞:調焦時物鏡嚴禁接觸試樣;切換物鏡前,確保載物臺中心與物鏡中心對齊。
防污染:勿用手觸摸鏡頭;鏡頭臟污用鏡頭紙蘸無水酒精-乙醚混合液(1:1)輕擦。
光源保護:亮度適中,避免長時間高亮度使用;關機前調至最暗。
油鏡專用:100×油鏡僅用香柏油,使用后立即清潔,防止腐蝕鏡頭鍍膜。
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