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Sulfo-Cy7.5 maleimide

MCE 國際站：Sulfo-Cy7.5 maleimide

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-D1566

純度：96.05%

存儲條件：-20°C, sealed storage, away from moisture and light *In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

運輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產品活性：Sulfo-Cy7.5 maleimide 是一種 CY 染料。CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫，是由奇數個甲基單位連接的兩個氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發射可調、消光系數高、水溶性好、合成相對簡單等特點。CY 系類染料常被用于蛋白，抗體以及小分子化合物的標記，對于蛋白抗體的標記，可以通過簡單的混合反應來完成結合，以下我們介紹了蛋白抗體標記的標記方法，具有一定的參考意義。

生物活性： Sulfo-Cy7.5 馬來酰亞胺是一種花青染料。 Sulfo-Cy7.5 馬來酰亞胺是一種近紅外熒光團，吸收和發射范圍約為 800 nm。 Sulfo-Cy7.5 馬來酰亞胺具有高度親水性。 Sulfo-Cy7.5 馬來酰亞胺可用于標記蛋白質和多肽的 SH 基團。 Sulfo-Cyanine7.5可用于選擇性葡萄糖識別研究sup>[1]。

體外：原液制備1. 蛋白準備為了獲得最-佳標記效果，請將蛋白 (抗體) 濃度配制為 2 mg/mL。1) 蛋白溶液 pH 值應為 8.5±0.5，若 pH 低于 8.0，則用 1 M 碳酸氫鈉進行調整。2) 若蛋白濃度低于 2 mg/mL，標記效率會大大降低，為了獲得最-佳標記效率，建議最終蛋白質濃度范圍為 2-10 mg/mL。3) 蛋白必須在不含伯胺 (如 Tris 或甘氨酸) 和銨離子的緩沖液中，否則會影響標記效率。2. 染料準備將無水 DMSO 稀釋 CY 染料，制成 10 mM 儲備溶液。通過玻璃管或旋渦充分混合。注：CY 儲存液建議分裝后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。3. 染料工作液用量計算標記反應所需的 CY 染料用量取決于要標記蛋白的用量，CY 染料與蛋白的最-佳摩爾比為 10 左右。例：假如所需標記蛋白為 500 μL 2 mg/mL 的 IgG (MW=150,000),用 100 μL DMSO 溶解一管 1 mg CY 染料，則所需 CY 體積為 3.95 μL，詳細計算流程如下 (以 CY3-NHS ester 為例) ：1) mmol (IgG) = mg/mL (IgG) ×mL (IgG) / MW (IgG) =2 mg/mL×0.5 mL / 150,000 mg/mmol= 6.7×10-6 mmol2) mmol (CY3-NHS ester) = mmol (IgG) ×10 =6.7×10-6 mmol×10 = 6.7×10-5 mmol3) μL (CY3-NHS ester) = mmol (CY3-NHS ester) ×MW (CY3-NHS ester) / mg/μL (CY3-NHS ester) = 6.7×10-5 mmol× 590.15 mg/mmol / 0.01 mg/μL =3.95 μL (CY3-NHS ester) 使用方法1. 標記反應1) 取算好體積的新鮮配制的 10 mg/mL CY 染料緩慢加入到 0.5 mL 蛋白樣品溶液中，輕輕搖勻混合，然后短暫離心將樣品收集在反應管底部。切忌劇烈混勻，防止蛋白樣品變性失活。2) 將該反應小管置于避光處，在室溫條件下輕輕搖晃孵育 60 分鐘，每隔 10–15 分鐘，將反應小管輕輕顛倒幾次，以充分混合兩種反應物，提高標記效率。2. 蛋白純化脫鹽以下方案是使用 SepHadex G-25 柱純化染料蛋白偶聯物為例。1) 按照生產說明書制備 SepHadex G-25 柱。2) 將反應混合物裝入 SepHadex G-25 色譜柱頂部。3) 當樣品運行到頂部樹脂表面下方時，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4)。4) 向所需樣品中加入更多的 PBS (pH 7.2-7.4),完成柱純化。結合含有所需要的染料-蛋白質綴合物的組分。 MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。

Emission (Em)：820

Excitation (Ex)：770

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參考文獻：

[1]. Sepasizangabadi, et al. Near infrared fluorescent sensors for selective glucose recognition. 2021.  
[2]. Ptaszek M. Rational design of fluorophores for in vivo applications. Prog Mol Biol Transl Sci. 2013;113:59-108.
[3]. Shindy, H. A. (2017). Fundamentals in the chemistry of cyanine dyes: A review. Dyes and Pigments, 145, 505–513. doi:10.1016/j.dyepig.2017.06.029