MedChemExpre...

立即詢價

您提交后，專屬客服將第一時間為您服務

干貨分享 | 瓊脂糖凝膠珠助你“玩轉”標簽蛋白與天然蛋白 (下)

閱讀：175 發布時間：2025-9-22

在上篇中，我們深入盤點了多種標簽蛋白親和填料，但實驗室里的“主角"遠不止帶標簽的重組蛋白。書接上回！本篇將聚焦肝素、藍色瓊脂糖、離子交換、疏水層析等天然蛋白純化常用填料，帶你理清各類機制、應用策略和選型技巧，為復雜樣本凈化提供切實可行的解決方案！

在沒有標簽“導航"的情況下，純化天然蛋白就像在沒有路標的叢林中尋找寶藏。要想找到目標蛋白，就必須精準識別它的“物理化學特征"，依靠載量大、分辨率高、洗脫可調的層析策略逐步篩選提純。

Section.01

天然蛋白純化的核心邏輯:

依靠“自身屬性"篩選

與標簽蛋白不同，天然蛋白純化不能依靠配基特異性，而是要“充分利用蛋白自身的特性"來設定純化參數^[1]。

Section.02

天然蛋白純化的黃金三步法

Step 1：離子交換層析 (IEX) ——電荷篩選的“高速入口"

利用蛋白質在特定 pH 條件下所呈現的電荷狀態 (帶正電或負電)，通過與相應帶電的離子交換層析介質作用，實現蛋白質的選擇性分離。

Step 2：疏水作用層析 (HIC) ——活性友好型純化方式

高鹽環境可增強蛋白質間的疏水相互作用，使目標蛋白結合至疏水層析介質；隨后通過降低鹽濃度的梯度洗脫，實現溫和分離。

Step 3：分子篩層析 (SEC) ——最后的“拋光"步驟

利用蛋白的相對分子量差異分離目標蛋白與聚合物、降解產物等雜質。

Section.03

特殊親和填料:

識別“天然結合特性"

某些天然蛋白具有特定結合能力，專屬親和填料才是對它們的“靈魂拷問"。

案例分析

Section.04

天然蛋白純化組合策略推薦

一招鮮吃遍天？不如多步組合出奇效，多級層析打出純化“連環技"。

專業術語

IEX：Ion Exchange Chromatography，離子交換層析

HIC：Hydrophobic Interaction Chromatography，疏水層析

SEC：Size Exclusion Chromatography，分子篩層析/凝膠過濾

DEAE：Diethylaminoethyl，弱陰離子交換

Q：Quaternary Ammonium，強陰離子交換

CM：Carboxymethyl，弱陽離子交換

Phenyl，Butyl，Octyl：疏水層析介質

Superdex：Superdex Size Exclusion Resin，高分辨率分子篩介質

Affinity：Affinity Chromatography，親和層析

Blue：Cibacron Blue，藍色配基，模擬核苷酸結合位點

Sephacryl：Sephacryl Size Exclusion Resin，分子篩層析

Heparin：Heparin group，肝素層析

小貼士：天然蛋白純化常見問題及解決策略

天然蛋白的純化，是科研人員“見招拆招"的實戰修煉場。盡管沒有放之四海而皆準的固定模板，但卻有一套可循的系統化策略——從電荷性質、疏水性、分子量到天然的結合特性，搭配合適的層析填料和緩沖體系組合，依然能在“無標簽"的局面下，理性破局，穩扎穩打。真正實現：不靠標簽，照樣把蛋白“撩"回來！

Section.05

小結

從肝素到離子交換，從疏水到多模式，天然蛋白的純化之路充滿挑戰，但好填料能助力你事半功倍。感謝閱讀，讓我們繼續探索更多高效、穩定、可放大的純化解決方案，為每一份蛋白賦能！

#文末互動#：

你最-常-用的天然蛋白純化策略是哪種？有哪些填料是你的“心頭好"？評論區見，我們一起來聊聊！留言分享實驗具體經驗，點贊前五名送出【霸王茶姬-30元代金券】

產品推薦

親和層析柱 (HY-K0221)

自由裝填想咋配就咋來，靈活親和一步到位！

肝素瓊脂糖 6FF (HY-K0253)

血液因子好搭檔，親水蛋白輕柔分離不傷身！

強陽離子交換層析介質 6FF (HY-K0257)

帶負蛋白快上車，強陽換柱穩得很！

強陰離子交換層析介質 6FF (HY-K0260)

正電伙伴來集合，強陰吸附準狠快！

疏水層析介質 (Octyl) 6FF (HY-K0266)

疏水精分一把手，Octyl 珠珠穩如山！

[1] Wu M, et al. Isolation and purification of immunoglobulin G from bovine colostrums by hydrophobic charge-induction chromatography. J Dairy Sci. 2015 May;98(5):2973-81.

[2] Fekete S, et al. Hydrophobic interaction chromatography for the characterization of monoclonal antibodies and related products. J Pharm Biomed Anal. 2016 Oct 25;130:3-18.

[3] Semwal S, et al. Small-angle X-ray scattering of engineered antigen-binding fragments: the case of glycosylated Fab from the Mannitou IgM antibody. Acta Crystallogr F Struct Biol Commun. 2025 Jan 1;81(Pt 1):19-29.

[4] Koide T, et al. Human histidine-rich glycoprotein: simultaneous purification with antithrombin III and characterization of its gross structure. J Biochem. 1985 Nov;98(5):1191-200.

干貨分享 | 瓊脂糖凝膠珠助你“玩轉”標簽蛋白與天然蛋白 (下)

會員登錄

收藏該商鋪

提示